Question

回答下列（一）、（二）小题：

（一）菊花组织培养的部分过程如下图：

（1）过程①利用_______（较高/较低）渗透压，使原生质体产量大幅度提高，但存活率却因此而降低，分析降低的原因可能是___________________________。过程②细胞壁形成后，可逐渐__________渗透压。

（2）幼苗茎段带叶，就会带有____________，也就有了分生组织，所以不通过___________阶段就可直接形成丛状苗。过程③应在______________（从具体功能角度）培养基中进行，全过程对光照要求是________。

A．早期每天24h光照，后期每天24h黑暗           B．每天一定时长的光照

C．早期每天24h黑暗，后期每天24h光照           D．每天24h黑暗

（二）科学家将蜘蛛的蛛丝蛋白基因导入山羊体内，得到转基因山羊，使羊奶中含有一种独特的蛛丝蛋白，生产原理见下图。请回答：

（1）将蛛丝蛋白基因和载体通过甲过程形成的X物质为_____________，可用___________法将X导入受体细胞。

（2）为了获得蛛丝蛋白，图中的受体细胞应该选择_________羊（填性别）的体细胞，要使重组细胞具有全能性，乙过程需要的技术操作是______________。

（3）丙过程中，核DNA被重新编排，胚细胞开始表达自己的基因，进而调控胚在代孕母体子宫中进一步发育的原因是_____________________________。

A．该过程所用培养液的成分与乙过程相同
B．该过程需定期用胰酶处理成细胞悬液进行传代培养
C．该过程为动物细胞培养，目的是获得更多的重组细胞
D．该过程中供体核DNA上原有的调节蛋白会被卵细胞质中的蛋白因子替换

（4）为了快速繁殖转基因山羊，可在丁过程前对早期胚胎进行___________，经培养后再分别移植到同期发情处理的____________的代孕母羊的相应部位。

Answer

较高 过度失水损伤/死亡 降低 腋芽/芽 愈伤组织/脱分化 发芽/生芽 B 重组DNA分子 显微注射 雌 核移植 D 胚胎分割 未经配种

【解析】

（一）图中①过程为获得原生质体的过程，②过程为再生细胞壁的过程，新细胞经过植物组织培养可获得新植株。③过程是用带叶的菊花幼苗茎切断直接培养形成丛状苗，然后丛状苗再形成新植株。

（二）分析题图，甲表示构建基因表达载体，X表示重组DNA分子；乙表示核移植技术；丙表示动物细胞培养或早期胚胎培养；丁表示胚胎移植。

（一）（1）过程①是制备原生质体的过程，为防止原生质体吸水膨胀破裂，利用较高渗透压溶液，使原生质体产量大幅度提高，但存活率却因此而降低，其降低的原因可能是过度失水损伤或死亡，过程②细胞壁形成后，可逐渐降低细胞外液渗透压，这样细胞即使吸水，也不会涨破。

（2）幼苗茎段带叶，就会带有腋芽，也就有了分生组织，所以不通过愈伤组织（或脱分化）阶段就可直接形成丛状苗。过程③应在发芽或生芽培养基中进行，再分化需要光照，故全过程每天需要一定时长的光照，故选B。

（二）（1）根据以上分析可知，图中X表示重组DNA分子，将其导入动物细胞常用显微注射法。
（2）根据题意分析，该实验的目的是从羊奶中提取独特的蛛丝蛋白，因此图中的受体细胞应该选择雌羊的体细胞；由于体细胞核的全能性受到了限制，因此应该将体细胞核通过核移植技术移植到去核的卵母细胞中去，获得的重组细胞才能具有表达细胞核的全能性的能力。
（3）A、根据以上分析可知，乙、丙分别表示核移植技术和早期胚胎培养技术，两者需要的培养液的成分不完全相同，A错误；

B、该过程需要培养成早期胚胎，不能用胰蛋白酶分散成单个细胞，B错误；

C、该过程为动物细胞培养，目的是获得早期胚胎，C错误；

D、该过程中供体核DNA上原有的调节蛋白会被卵细胞质中的蛋白因子替换，D正确。

故选D。
（4）为了快速繁殖转基因山羊，可在丁过程前对早期胚胎进行胚胎分割，经培养后再分别移植到同期发情处理的未经配种的代孕母羊的相应部位。