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神经纤毛蛋白-1 ( NRP-1) 是血管内皮生长因子的新型受体,通过参与多种信...

神经纤毛蛋白-1 NRP-1 是血管内皮生长因子的新型受体,通过参与多种信号转导来促进肿瘤血管的生成。本研究将为 NRP-1  单克隆抗体靶向治疗乳腺癌提供数据基础。

1)取乳腺癌 MCF7)组织块,运用_____技术获得 MCF7  细胞用于后续实验。 用重组的人_____蛋白对小鼠进行注射, 使小鼠产生免疫反应, 制备杂交瘤细胞,将杂交瘤细胞转到多孔培养板上培养,吸取培养孔中的________(填“ 上清液”或“沉淀细胞”),进行抗体阳性检测。经多次筛选和细胞培养,获得 NRP-1  单克隆抗体 NRP-1 MAb

2)将 MCF7  细胞制成单细胞悬液,等量注入组裸鼠右前腋下,接种后天开始给药, 共给药次。每隔天测算一次肿瘤的肿瘤体积,如下图所示。

对照组注射_____,从上图中可以看出_____

3)注射不同剂量 NRP-1 MAb 33  天后,剥离肿瘤组织称重,实验结果如下图:

该结果表明____________________________________________________

4)基于以上研究,科学家们对该抗体的用药方式有两种观点:谨慎用药和适宜浓度用药。 你支持哪个观点,并说出理由___________________________________

 

动物细胞培养 神经纤毛蛋白-1(NRP-1) 上清液 等量的生理盐水 NRP-1 MAb 能够有效地降低肿瘤的体积,中、高浓度抗体的降低效果比低浓度的效果更显著 NRP-1 MAb 可以明显降低肿瘤组织的重量,中、高浓度抗体的降低效果稍微没有低浓 度的好,但这种差异并不显著 )第 1 种答案:支持谨慎用药 理由:随着治疗时间的延长,中高剂量和低剂量的 NRP-1 MAb 在降低肿瘤体积和降低肿瘤重量上出现的不一致性可能会加大,应进行后续研究,现阶 段谨慎用药。 第 2 种答案:支持适宜浓度用药 理由:该抗体已经显示了显著的抑瘤效果,中高剂量和低 剂量的 NRP-1 MAb 在降低肿瘤体积和降低肿瘤重量上虽然出现了不一致性,但这种不一致性 很小,可以考虑适宜浓度用药。 【解析】 动物细胞融合,又称细胞杂交,指将两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程,融合后形成具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞,称为杂交细胞。 单克隆抗体制备的过程中需要经过两次筛选,第一次用选择培养基筛选出杂交瘤细胞;第二次用专一抗体检测筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞。 (1)取乳腺癌(MCF7)组织块,需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶进行分散处理后,运用动物细胞培养技术获得MCF7细胞。要制备NRP-1单克隆抗体,需要用重组的人NRP-1蛋白对小鼠进行注射,使小鼠产生免疫反应,产生相应的浆细胞,与该浆细胞与骨髓瘤细胞进行融合处理,制备杂交瘤细胞。将杂交瘤细胞转到多孔培养板上培养,可以从培养液即上清液中提取到单克隆抗体,可以用抗原-抗体杂交技术进行抗体阳性检测。经多次筛选和细胞培养,获得NRP-1单克隆抗体(NRP-1 MAb)。 (2)实验的自变量是给药的剂量和时间,因变量是肿瘤的体积,对照组应该注射等量的生理盐水,根据实验结果可知,NRP-1 MAb 能够有效地降低肿瘤的体积,中、高浓度抗体的降低效果比低浓度的效果更显著。 (3)注射不同剂量NRP-1 MAb 33天后,剥离肿瘤组织称重,根据实验数据可知,NRP-1 MAb 可以明显降低肿瘤组织的重量,中、高浓度抗体的降低效果稍微没有低浓度的好,但这种差异并不显著。 (4)支持谨慎用药理由 :随着治疗时间的延长,中高剂量和低剂量的 NRP-1 MAb 在降低肿瘤体积和降低肿瘤重量上出现的不一致性可能会加大,应进行后续研究,现阶段谨慎用药。 支持适宜浓度用药 理由:该抗体已经显示了显著的抑瘤效果,中高剂量和低剂量的 NRP-1 MAb 在降低肿瘤体积和降低肿瘤重量上虽然出现了不一致性,但这种不一致性很小,可以考虑适宜浓度用药。
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考点分析:
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普通小麦为六倍体,染色体的组成为AABBDD=42。普通小麦的近缘物种有野生一粒小麦(AA)、提莫菲维小麦(AAGG)和黑麦(RR)等,其中A、B、D、G、R分别表示一个含7条染色体的染色体组。黑麦与普通小麦染色体组具有部分同源关系。研究人员经常采用杂交育种的方法来改善小麦品质。

(1)野生一粒小麦含抗条锈病基因和抗白粉病基因,普通小麦无相应的等位基因,改良普通小麦通常采用如下操作:将纯合野生一粒小麦与普通小麦进行杂交获得F1,然后再___________获得F2。若两个基因独立遗传,则在F2中同时具有抗条锈病和抗白粉病的个体最可能占_______________

(2)野生提莫菲维小麦(AAGG)含抗叶斑病基因(位于G组染色体上),可以通过如下方案改良普通小麦:

①杂种F1染色体的组成为_______________

②F1产生的配子中,理论上所有配子都含有_______________组染色体。

③检测发现F2中G组染色体的抗病基因转移到了A组染色体上,原因是60Co射线照射F1导致细胞内发生___________________________变化,F2与普通小麦杂交选育F3,F3自交多代选育抗叶锈病普通小麦新品种(AABBDD)。

(3)利用黑麦(RR)采取与(2)相同的操作改良普通小麦时,培育出了多个具有黑麦优良性状的普通小麦改良品种(AABBDD),而且自交多代稳定遗传。为研究相关机制,科研人员利用黑麦R组第6号、7号、3号染色体和普通小麦特异性引物扩增,相关结果如下:

图1R组的6号染色体特异引物pSc119.1扩增结果

注:M:标准物;1:黑麦;2:普通小麦;3:R组6号染色体;4~15:待测新品系。

 

图2R组的7号染色体特异引物CGG26扩增结果

注:M:标准物;1:黑麦的7号染色体;2:普通小麦;3~8:待测新品系。

图3R组的3号染色体特异引物SCM206扩增结果

注:M:标准物;1:黑麦的3号染色体;2:普通小麦;3~7:待测新品系。

在上述检测中R组6号染色体的750bp条带,R组7号染色体的150bp条带,R组3号染色体的198bp条带对应的品种具有不同的优良抗病性状。其中__________号品系具有全部抗病性状。

(4)研究人员通过光学显微镜观察普通小麦改良品种染色体,观察有丝分裂中期染色体的_____________,观察减数分裂染色体的_______________行为,可以从细胞学角度判断新品系是否稳定遗传。

(5)进一步利用不同荧光素标记的探针检测小麦和黑麦染色体片段,可知普通小麦改良品种染色体中含有R组染色体片段。由于R组染色体中有普通小麦染色体的同源区段,因此普通小麦改良品种在进行减数分裂时_____________,从而使其细胞中染色体更加稳定,该研究也为小麦品种改良提供新思路。

 

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阅读下面的材料,完成(1~4)题。

早在 Natalie Nakles 出生前,甚至是来自她母亲的卵子成熟之前,奇怪的事情就发生了。那颗卵子本应只携带一条 16 号染色体,结果最后却多出了一条。而随后的一系列过程,让 Nakles 的受精卵发育时移除了来自精子的 16 号染色体。因此,现今 24 岁的 Nakles 并不像大多数人一样从父母身上各继承了一组染色体,她的两条 16 号染色体全部来自母亲。

这种现象被称为“单亲二体性”,即 23 对染色体中某一对的两条染色体都来自父亲或母亲一方。早期研究表明单亲二体性与自然流产有着密切关系,即便胎儿存活,它也有可能患有骨骼异常、癫痫、智力障碍和儿童癌症等疾病。例如,如果两条 15 号染色体都来自母亲,会导致普拉德-威利综合征,根据相关病症也被称做低肌张力-低智力-性腺发育低下-肥胖综合征;而如果 15 号染色体都来自父亲,则会导致天使人综合征,患儿会产生发育迟缓,智力残疾,严重的言语障碍以及运动和平衡问题。它们都是具有明显症状的特殊遗传疾病。Nakles 就患有阿斯伯格综合征,这是一种自闭症谱系疾病,但不会有自闭症患者的语言和智力障碍。除此之外她很健康,没有什么严重的健康问题。

如今,一项研究对大约 483 万人的 DNA 进行了检测,其中 440 万来自基因检测公司,43 万来自英国生物样本库。结果显示,许多像 Nakles 这样的健康人身上都存在单亲二体性。该研究共找到了 675 个单亲二体的样本,且没有发现其与任何有害特征存在显著相关。这表明,单亲二体性现象比过去文献中的结果更普遍,且危害性更低。

1)就进行有性生殖的生物来说,__________________ 对于维持每种生物前后代体细胞中染色体数 目的恒定,对于生物的遗传和变异,都是十分重要的。

2)下列叙述正确的是________

A.单亲二体的出现通常是减数第一次分裂异常

B.天使人综合征是由于染色体数目变异导致的

C.同源染色体分离发生在减数第一次分裂

D.单亲二体的后代一定患病

3)请根据文章内容,结合已有知识,用文字或图解的形式提出单亲二体性形成机制的两种假说?__________________________________________________________________________

4)如果单亲二体性确实造成了健康问题,你推测可能的原因有哪些?_________________________________________________________________________

 

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雷帕霉素是一种新型酯类免疫抑制剂,研究者通过实验探究雷帕霉素对小鼠成肌细胞能量代谢的影响。

1____是驱动细胞生命活动的直接能源物质,动物细胞中该物质中的能量来自_____这一代谢过程,发生场所为_____

2PGC-1YY1 mTOR 是细胞中调节线粒体基因转录的转录因子。研究人员用一定浓度的雷帕霉素处理小鼠成肌细胞,检测转录因子 PGC-1 RNA 相对含量和蛋白质含量。图1 结果显示:_______________

3)免疫共沉淀技术是在体外进行的研究蛋白质相互作用的一种技术。其原理是抗体 A 可与蛋白A 特异性结合,因此使用抗体 A 可将蛋白 A“沉淀”。如果蛋白 B 与蛋白 A 相互结合,那么抗体 A 在将蛋白 A“沉淀”的同时,也会把蛋白B“沉淀”下来。此技术常用于寻找和筛选与已知蛋白质发生相互作用的蛋白质。

①研究人员欲研究这三种转录因子(蛋白质)之间的相互作用。利用免疫共沉淀技术,检测不同处理条件下,PGC-1YY1mTOR YY1 抗体“沉淀”的情况,结果如图 2。实验中研究人员检测各蛋白提取结果的目的是_______________。根据图 2 结果,请在图 3 中构建线粒体中雷帕霉素与被沉淀蛋白间的互作模式图。

②若想验证该互作模式,可继续选择_____amTORbPGC-1c:无关)抗体进行免疫共沉淀。 若互作模式成立,请在图 4 中相应位置用“—”画出可“沉淀”出的条带_____

4)综合上述实验,说明雷帕霉素对细胞能量代谢影响的分子机制是_____

 

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赤腹松鼠是植食为主的树栖啮齿动物,常破坏林木的树皮,是主要的森林害鼠。为了防治赤腹松鼠对人工林的危害,四川洪雅林场的技术人员用PVC软管制作毒饵站,并对毒饵站防治赤腹松鼠的效果进行研究。

1)洪雅林场的赤腹松鼠构成了生态学上的一个__________。为了研究对赤腹松鼠的防治,技术人员需要调查赤腹松鼠________________,来评估防治的效果。

2)利用投放毒饵来防治赤腹松鼠对林木的危害,其生态学的原理是_________________

3)在进行毒饵站防治赤腹松鼠危害效果的研究中,为了排除无关变量的影响,从毒饵站和饵料两个方面分别需要考虑的是______________________

样地

总使用毒饵

袋数/

无毒饵料取食数(率)

投放毒饵前

投放毒饵后

3

4

5

6

7

9

12

A1

100

1818%

33%

22%

22%

00%

22%

33%

A2

100

2323%

22%

44%

33%

00%

22%

22%

B1

200

71355%

21%

105%

105%

00%

21%

00%

B2

200

5829%

315%

315%

21%

105%

105%

525%

C

200

43215%

5427%

5829%

3015%

189%

3819%

4221%

 

表:毒饵投放前后各月各样地无毒饵料取食数(率)

4)技术人员在林场内选取5块样地,其中4块防治样地,编号为A1A2B1B2A样地每公顷安装4个毒饵站,B样地每公顷安装8个毒饵站),以及1块对照样地,编号为C。样地在投放毒饵前后需要投放无毒饵料并记录取食数,这样操作的目的是__________。无毒饵料取食情况的结果如上表,由此可以得到的结论是_____________________________

5)基于此项研究,请为该林场未来的赤腹松鼠防治工作提出一项具体的措施。_______________________________________________________________________________

 

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离子的跨膜运输是神经兴奋传导与传递的基础。突触传递过程中,前、后膜内外离子的移动如下图所示。

请回答问题:

(1)当兴奋传导到突触前膜时,引起突触前膜对Na+通透性的变化趋势为______。在此过程中Na+离子的过膜方式是______

(2)引起突触前膜上Ca2+ 通道打开的原因是______

(3)图中①至④表示兴奋引发的突触传递过程。图中过程②表示______

(4)为研究细胞外Na+浓度对突触传递的影响,向细胞外液适度滴加含Na+溶液,当神经冲动再次传来时,膜电位变化幅度增大,原因是______

(5)在突触部位胞内的钙离子主要来自于胞外。为证明细胞内钙离子浓度可影响神经递质的释放量,提出可供实验的两套备选方案。

方案一:施加钙离子通道阻断剂,然后刺激突触前神经细胞,检测神经递质的释放量。再在该实验体系中适度增加细胞外液中的钙离子浓度,然后刺激突触前神经细胞,检测神经递质的释放量。

方案二:适度增加细胞外液中的钙离子浓度,然后刺激突触前神经细胞,检测神经递质的释放量。另取一组实验材料施加钙离子通道阻断剂,然后刺激突触前神经细胞,检测神经递质的释放量。

比较上述两个方案的优劣,并陈述理由 __________

 

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