Question

图甲、乙中标注了相关限制酶的酶切位点。培育转基因大肠杆菌的叙述错误的是（    ）

A.若通过PCR技术提取该目的基因，应该选用引物甲和引物丙

B.图中质粒和目的基因构建表达载体，应选用BclⅠ和Hind Ⅲ剪切

C.若将基因表达载体导入受体细胞中，需选用感受态的大肠杆菌

D.在受体细胞中，氨苄青霉素抗性基因和目的基因可同时表达

Answer

D

【解析】

基因工程技术的基本步骤：
1、目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。
2、基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
3、将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
4、目的基因的检测与鉴定：
（1）分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因：DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA：分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质：抗原-抗体杂交技术。
（2）个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

A、若通过PCR技术大量扩增该目的基因，应该选用引物甲和引物丙，A正确；

B、图甲中BamHⅠ同时切坏两种抗性基因，不能选用，故图乙中目的基因左侧只能选BclⅠ，而质粒上没有目的基因右侧Sau3A的切点，两者都有Hind Ⅲ的切点，为了防止目的基因与质粒随意连接，故质粒和目的基因构建表达载体，应选用BclⅠ和Hind Ⅲ剪切，B正确；

C、若将基因表达载体导入受体细胞大肠杆菌时，需用钙离子等处理，使其处于感受态，C正确；

D、在受体细胞中，插入目的基因时氨苄青霉素抗性基因被破坏，不能和目的基因可同时表达，D错误。

故选D。