Question

回答下列（一）（二）小题

（一）请回答泡菜制作以及乳酸菌分离纯化有关问题

（1）制作泡菜时，所用盐水需煮沸，其目的是________。为了缩短制作时间，可在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液，加入少量陈泡菜液的作用是________。从开始制作到泡菜品质最佳这段时间内，泡菜液逐渐变酸。这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其他杂菌的消长规律是________。

（2）某同学尝试从新鲜的泡菜滤液中分离纯化乳酸菌。首先需要用________对泡菜液进行梯度稀释，之后用________法接种到灭菌的培养基上，进行培养。培养过程不需要的操作是________（A．倒置 B．恒温 C．无氧 D．充入CO₂）

（二）白菜、甘蓝均为二倍体，体细胞染色体数目分别为 20、18。“白菜—甘蓝”是用细胞工程的方法培育出来的蔬菜新品种，它具有生长期短、耐热性强和易于储藏等优点。下图是“白菜—甘蓝”的杂交过程示意图，回答以下问题：

（1）为了得到原生质体需在0．5—0．6mol/L的__________环境中用_______来处理白菜细胞和甘蓝细胞。

（2）通常用________诱导原生质体融合，融合完成的标志是  ____________。在组织培养的过程中，植株幼苗的根、芽完全长成，将幼苗移至__________中，保持80%湿度，并逐渐降低湿度，直到与自然湿度接近后，移栽至土壤定植。

（3）通常情况下，白菜和甘蓝有性杂交是不能成功的，原因是____，若对白菜和甘蓝采用杂交育种 方法能成功的话，则得到的后代应含的染色体数和通过图示方法所获得的植株的染色体数分别是_____。

（4）植物体细胞杂交技术和传统杂交技术相比的优点是 _____________。

Answer

杀灭微生物 增加乳酸菌数量（接种乳酸菌菌种） 乳酸菌数量增多，杂菌数量减少 无菌水 涂布分离 D 甘露醇 果胶酶 聚乙二醇（PEG） 新细胞壁形成 草炭土或蛭石 存在生殖隔离 19，38 克服远缘杂交不亲和

【解析】

1、泡菜的制作所使用的微生物是乳酸菌，代谢类型是异养厌氧型，在无氧条件下乳酸菌能够将蔬菜中的葡萄糖氧化为乳酸。

2、泡菜的制作流程是：选择原料、配置盐水、调味装坛、密封发酵。

3、泡菜中的亚硝酸盐含量可以用比色法测定，即在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应生成重氮盐，重氮盐与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。

4、植物体细胞杂交的具体过程：

5、植物体细胞杂交的意义：克服元源杂交不亲和的障碍

Ⅰ（1）制作泡菜时，所用盐水要煮沸，其目的是消毒杀菌或灭菌除氧。陈泡菜液含有乳酸菌，可为泡菜发酵提供菌种，因此为了缩短制作时间，有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液；泡菜制作过程中，由于乳酸菌进行无氧呼吸产生乳酸，泡菜液逐渐变酸，随乳酸菌的数量增加，泡菜液的酸性增强，不耐酸的杂菌数量逐渐减少。

（2）分离纯化乳酸菌时，首先需要用无菌水对泡菜滤液进行梯度稀释，之后用涂布分离法接种到灭菌的固定培养基上，进行培养。培养过程需要将培养皿倒置放在无氧，恒温的培养箱中培养，故需要ABC三项操作，不需要D冲入二氧化碳。

Ⅱ（1）植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，为了得到白菜和甘蓝的原生质体，根据酶的专一性原理，可在0.5-0.6mol/L的甘露醇环境中用纤维素酶和果胶酶来处理白菜细胞和甘蓝细胞，从而去除细胞壁。

（2）通常用PEG（聚乙二醇）诱导原生质体融合；融合完成的标志是再生出新的细胞壁。在组织培养的过程中，植株幼苗的根、芽完全长成，将幼苗移至草炭土或蛭石中，保持80%湿度，并逐渐降低湿度，直到与自然湿度接近后，移栽至土壤定植。

（3）如图通过植物体细胞杂交技术获得的“白菜一甘蓝”体细胞染色体数为20+18=38；通常情况下，由于白菜和甘蓝之间存在生殖隔离，因此白菜和甘蓝有性杂交是不能成功的；若对白菜和甘蓝采用杂交育种方法能成功的话，得到的后代20/2+18/2=19条染色体。

（4）植物体细胞杂交技术和传统杂交技术相比的优点是克服元源杂交不亲和的障碍，培育作物新品种。