Question

W药物能够促进肺癌细胞凋亡，但长期使用会使肺癌细胞出现耐药性，若与双氢青蒿素配合使用，则不出现耐药性。为验证上述事实，请根据以下提供的实验材料与用具，完善实验思路，预测实验结果并进行分析。

实验材料和用具：耐药性肺癌细胞系、W药物、双氢青蒿素溶液、生理盐水、细胞培养液、胰蛋白酶、二氧化碳培养箱、培养瓶若干，细胞凋亡和增殖测定仪等。

(要求与说明： 以细胞凋亡率和增殖抑制率为指标，具体测量方法及实验中有关具体用量不作要求) 请回答：

（1）实验思路

①实验分组情况：

甲组：耐药性肺癌细胞+细胞培养液+W药物

乙组：耐药性肺癌细胞+细胞培养液+生理盐水

丙组：耐药性肺癌细胞+细胞培养液+______。

每组设置______。

②将各组培养瓶置于______的环境中培养。

③一段时间后将每组中样品经胰蛋白酶处理后，测定细胞凋亡数和增殖数，并记录。

④将获得的数据进行处理，并计算______。

（2）预测实验结果（以双纵坐标柱状图形式表示实验结果）

______。

（3）分析与讨论

①步骤③中用胰蛋白酶处理样品的目的是______，在吸取样液用于测定时需______，以减少误差。

②欲确定双氢青蒿素是否通过解除细胞耐药性而发挥作用，在上述实验基础上还需再增加一组实验，其操作思路为_______。

Answer

W药物+双氢青蒿素 多个重复样品 相同且适宜 各组的增殖抑制率和细胞凋亡率 使细胞分散 摇匀后等量取样 取等量耐药性肺癌细胞+细胞培养液+双氢青蒿素进行传代培养一段时间，取出肺癌细胞，置于含W药物的培养液中继续培养一段时间，测定细胞增殖和凋亡情况

【解析】

实验要遵循单一变量原则、等量原则、对照原则等。肺癌细胞能无限增殖，欲检测某药物对其是否有抑制作用，可设计对照实验，注意每组细胞数、试剂用量、作用时间等无关变量应该相同，自变量是加入的试剂（W药物等），因变量是增殖抑制率和细胞凋亡率，乙组（加入生理盐水的组）是对照组。

（1）①该实验是为了检测W药物和双氢青蒿素溶液对抑制耐药性肺癌细胞是否具有协同作用，所以丙组应该加入W药物和双氢青蒿素的混合溶液。每组设置多个重复样品，避免实验结果出现偶然性，做出错误的结论。②环境条件属于无关变量，应该相同且适宜。④增殖抑制率和细胞凋亡率是因变量，最终检测的应该是这个值。

（2）耐药性肺癌细胞对W药物具有耐药性，所以W药物组增殖抑制率、凋亡率和生理盐水组的基本一致，因为题干说到W药物和双氢青蒿素配合使用不出现耐药性，所以丙组能明显抑制癌细胞增殖以及促进凋亡。各组的实验结果如下：

（3）①胰蛋白酶可以分解组织细胞间质中的胶原蛋白，可使组织分散成单个细胞。每次吸取样液之前应该摇匀，才能保证癌细胞计数的准确。②欲确定双氢青蒿素对耐药性癌细胞的作用，可将药剂换成等量的双氢青蒿素溶液，其他步骤相同测得实验结果。