Question

研究表明从母瘤分离脱落的癌细胞首先要与正常细胞粘附才能转移。 为研究不同浓度物质 X 对癌细胞与毛细血管内皮细胞间粘附的影响，请根据以下提供的实验 材料与用具，完善实验思路，预测实验结果并进行分析与讨论。

材料与用具：培养瓶若干个、液体培养基、300μg/ml 的物质 X、癌细胞细胞株、内皮细 胞悬液、CO₂ 培养箱、PBS 溶液（用于洗去未粘附的细胞）

（要求与说明：物质 X 用液体培养基配制，不考虑培养液成分变化对培养物的影响；实 验条件适宜）

（1）实验思路：

①取培养瓶若干个均分为三组，分别加入等量且适量的液体培养基和内皮细胞悬液， 置于 37℃的 CO₂ 培养箱中培养 24h，使培养瓶中铺满单层内皮细胞。

② ______________________________________________。

③同时分别取等量的癌细胞转入上述培养瓶中。置于 37℃的 CO₂ 培养箱中培养一段 时间。

④用 PBS 溶液洗去未贴壁的细胞，测定相关值并计算细胞粘附率。

⑤___________________________________________。

（2）实验结果：正常对照组的粘附率为 100%，与正常对照组相比，加入物质 X 后，癌细 胞与内皮细胞间的粘附率明显降低，且 X 浓度越高，癌细胞与内皮细胞间的粘附率 下降越明显。请绘制柱状图表示上述结果___________________________ 。

（3）分析与讨论

①实验用的癌细胞细胞株可以通过_____法建立。获取癌细胞时需用_____________________处理癌细胞株，将癌细胞转入含内皮细胞的培养瓶后所进行的培养称为______________ 培养。

②导致癌细胞从母瘤分离脱落的原因可能是_______________。根据实验可推测： 物质 X 可能是通过减少肿瘤细胞与毛细血管内皮细胞的粘附率，来达到_______________的作用。

Answer

加入用液体培养基配制的低、高两种不同浓度的物质 X（或浓度为 150 和 300μg/ml)，对照组加入等体积的液体培养基 对实验数据进行分析与处理 柱形图如下： 【答题空4】克隆培养法 胰蛋白酶（胰酶） 传代 癌细胞膜表面粘连蛋白（糖蛋白）减少 抑制癌细胞转移

【解析】

本题考查了探究不同浓度物质X对癌细胞与毛细血管内皮细胞间粘附的影响，意在考察考生设置对照组和实验组的能力，分析实验结果得出实验结论的能力。

（1）实验思路：

①取培养瓶若干个均分为三组，分别加入等量且适量的液体培养基和内皮细胞悬液，置于37℃的CO2培养箱中培养24h，使培养瓶中铺满单层内皮细胞。

②加入用液体培养基配制不同浓度的物质X（浓度为150和300μg/ml），对照组加入等体积的液体培养基。

③同时分别取等量的癌细胞转入上述培养瓶中，置于37℃的CO2培养箱中培养一段时间。

④用PBS溶液洗去未贴壁的细胞，测定相关值并计算细胞粘附率。

⑤对实验数据进行分析与处理。

（2）实验结果：正常对照组的粘附率为100%，与正常对照组相比，加入物质X后，癌细胞与内皮细胞间的粘附率明显降低，且X浓度越高，癌细胞与内皮细胞间的粘附率下降越明显。请绘制柱状图表示上述结果。如下：

（3）分析与讨论：

①实验用的癌细胞细胞株可以通过克隆培养法建立。获取癌细胞时需用胰蛋白酶（胰酶处理癌细胞株，将癌细胞转入含内皮细胞的培养瓶后所进行的培养称为传代培养。

②导致癌细胞从母瘤分离脱落的原因可能是癌细胞膜表面粘连蛋白（糖蛋白）减少。根据实验可推测：物质X可能是通过减少肿瘤细胞与毛细血管内皮细胞的粘附率，来达到抑制癌细胞转移的作用。