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萌发的大麦种子中存在着两种淀粉酶:α 淀粉酶和α 淀粉酶。α 淀粉酶耐热不耐酸;...

萌发的大麦种子中存在着两种淀粉酶:α 淀粉酶和α 淀粉酶。α 淀粉酶耐热不耐酸;β 淀粉酶耐 酸不耐热,70 ℃处理 15 min 即变性失活。为测定萌发种子中 α 淀粉酶和 β 淀粉酶活性的差异,将发芽 3 天的大麦种子加蒸馏水研磨匀浆、离心取上清液得到淀粉酶提取液,进行如下实验。

操作步骤

1号试管

2号试管

3号试管

加淀粉酶提取液

1mL

1mL

1mL

预处理

70℃恒温水浴15min
取出冰浴中冷却

高温使α  淀粉酶
α  淀粉酶失活

不处理

加缓冲液

2mL

2mL

2mL

预保温

40℃恒温水浴lOmin

40℃预热的
淀粉溶液

2mL

2mL

2mL

保温

40℃恒温水浴5min

测定

加入试剂5065℃水浴5min,测定砖红色沉淀物的量

 

回答下列问题:

(1)步骤⑦中加入的试剂 X ______

(2)上述实验操作步骤中,步骤②中对 1 号试管进行操作的目的是_____;为达成实验目的,设置的 123 号试管中,为对照组的一组是______号试管。

(3)通过上述实验,能大致比较萌发  3  天时种子的  α-淀粉酶和  β-淀粉酶活性的大小。比较的方法 ______

 

斐林试剂 使β-淀粉酶变性失活 2 测定各试管沉淀物的量,1、2号试管的差值代表α-淀粉酶的活性,3、1号试管的差值代表β-淀粉酶的活性,差值大的表示该酶的活性大 【解析】 本实验的目的是测定萌发种子中α-淀粉酶和β-淀粉酶活性的差异;萌发的大麦种子中存在着两种淀粉酶:α-淀粉酶和β-淀粉酶。α-淀粉酶耐热不耐酸;β-淀粉酶耐酸不耐热,70℃ 处理15min即变性失活。若测定大麦种子中α-淀粉酶催化效率,因此要根据β-淀粉酶不耐热,在70℃15min后失活的特性排除β-淀粉酶的干扰。淀粉酶能将淀粉水解成还原糖,而还原糖可以用斐林试剂进行鉴定。 (1)本实验的目的是测定萌发种子中α-淀粉酶和β-淀粉酶活性的差异,淀粉酶分解淀粉为还原糖,还原糖可以用斐林试剂进行鉴定,步骤⑦中加入的试剂X为斐林试剂。 (2)β-淀粉酶耐酸不耐热,70℃处理15min即变性失活。上述实验操作步骤中,步骤②中对1号试管进行操作的目的是使β-淀粉酶变性失活,测定大麦种子中α-淀粉酶催化效率,为达成实验目的,设置的1、2、3号试管中,为对照组的一组是2号试管(2号试管α-淀粉酶和β-淀粉酶均失活,不能将淀粉变为还原糖,2号和1号对比能测定α-淀粉酶催化效率)。 (3)通过上述实验,可以测定各试管沉淀物的量,1、2号试管的差值代表α-淀粉酶的活性,3、1号试管的差值代表β-淀粉酶的活性,差值大的表示该酶的活性大,从而能大致比较萌发3天时种子的α-淀粉酶和β-淀粉酶活性的大小。
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考点分析:
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某种番茄的黄化突变体与野生型相比,叶片中的叶绿素、类胡萝卜素含量均降低。净光合作用速率(实际光合作用速率-呼吸速率)、呼吸速率及相关指标见下表。

材料

叶绿素a/b

类胡萝卜素/叶绿素

净光合作用速率

μmolCO2·m2·s1

细胞间CO2浓度

μmol CO2·m2·s1

呼吸速率

μmolCO2·m2·s1

突变体

930

032

566

23907

360

野生型

694

028

813

21086

407

 

 

1)叶绿体中色素可用______________提取;下图为野生型叶片四种色素在滤纸条上的分离结果,其中____________(填标号)色素带含有镁元素。

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