Question

下图为某科研小组采用“基因靶向”技术，对ES细胞进行的遗传改造。先将小鼠的棕褐毛色基因导入黑色纯种小鼠的胚胎干细胞(ES细胞)中，再将改造后的胚胎干细胞移植回囊胚继续发育成小鼠的过程。据图分析不正确的是

A.第Ⅱ步使用的工具酶是DNA连接酶以及限制酶

B.完成第Ⅱ步操作，得到由两个DNA片段连接成的产物，必定是载体与棕褐毛色基因形成的重组DNA分子

C.第Ⅲ步操作完成后，还需筛选出目的基因已成功导入的胚胎干细胞，并将该胚胎干细胞注射到囊胚中

D.ES细胞除可进行如图操作外，也可进行冷冻保存

Answer

B

【解析】

：图示表示采用“基因靶向”技术对ES细胞进行遗传改造的过程,其中Ⅰ表示获取目的基因,该过程需要限制酶；Ⅱ表示基因表达载体的构建过程；Ⅲ表示将重组质粒导入ES细胞的过程；Ⅳ表示将含有重组质粒的ES细胞注入囊胚中的过程；最后采用胚胎移植技术。

A、第Ⅱ步为基因表达载体的构建过程,该过程需使用的工具酶是DNA连接酶以及限制酶，A正确；

B、完成第Ⅱ步操作,得到由两个DNA片段连接成的产物,可能是载体与棕褐毛色基因形成的重组DNA分子,也可能是载体自身连接的产物或棕褐毛色基因自身连接的产物，B错误；

C、第Ⅲ步操作完成后,还需筛选出成功导入目的基因的胚胎干细胞,并将该胚胎干细胞注射到囊胚中，C正确；

D、在体外培养条件下,ES细胞可不断增殖而不发生分化,可以进行某些遗传改造,也可进行冷冻保存，D正确。

故选B。