Question

某研究小组为测定药物对体外培养细胞的毒性，准备对某种动物的肝肿瘤细胞(甲)和正常肝细胞(乙)进行动物细胞培养。下列说法正确的是(　　)

A.用于核移植的供体细胞一般都选用传代50代以内的细胞

B.细胞培养应在CO₂培养箱中进行，CO₂的作用是作为细胞代谢原料

C.取甲细胞进行培养，传至10代～50代就会完全停止

D.乙细胞在原代培养过程中，最终会出现停止增殖的现象

Answer

D

【解析】

1、动物细胞培养的过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。
2、培养条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和PH．（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH值）。

A、动物细胞培养过程中，一般传至10代以内的细胞能保持正常的二倍体核型，所以用于核移植的供体细胞一般都选用传代10代以内的细胞，A错误；

B、细胞培养应在CO2培养箱中进行，CO2的作用是是维持培养液的pH，B错误；

C、甲细胞为肝肿瘤细胞，能够无限增殖，因此取甲细胞进行培养，传至10代～50代时细胞的增殖也不会停止，C错误；

D、乙细胞是正常的肝细胞，在原代培养过程中，由于细胞的接触抑制，最终会出现停止增殖的现象，D正确。

故选D。