Question

[生物--选修1：生物技术实践]某实验小组欲从豆油污染的土壤中筛选出能高效降解脂肪的菌株。请回答：

（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以_____________为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于___________培养基。

（2）为避免培养皿污染，需将培养皿呈____________状态放置。为避免培养液中菌体浓度过高，需将培养液进行__________处理。为了排除培养基被污染，需设置接种______________的培养基作为空白对照。

（3）为了筛选出菌株，可将适量的_________试剂滴加在平板中的菌落周围，洗去浮色后，如果菌落周围出现透明圈，则说明此种菌能够分泌脂肪酶。纯化菌种时，为了对活菌进行计数，可采用___________法接种于新的培养基平板上。

Answer

豆油（脂肪） 选择 倒置 梯度稀释（或系列稀释） 等量无菌水 苏丹III（苏丹IV） 稀释涂布平板

【解析】

试题分析：微生物的培养基按用途分，可以分为选择培养基和鉴别培养基。选择培养基主要是培养、分离特定的微生物，培养酵母菌可在培养基中加入青霉素；鉴别培养基可以鉴定不同的微生物，比如鉴别饮用水中是否含有大肠杆菌，可以用伊红-美蓝培养基，如果菌落呈深紫色，并带有金属光泽，说明有大肠杆菌。微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落；②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

（1）欲筛选出能降解豆油的菌株，培养基中应只含有豆油而无其它碳源，不能降解豆油的细菌在此培养基上不能生存，从功能上讲，这类培养基属于选择培养基。

（2）为避免培养皿污染，需将培养皿呈倒置状态放置．为避免培养液中菌体浓度过高，需将培养液进行梯度稀释处理．为了排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，需设置接种等量无菌水的培养基作为空白对照。

（3）脂肪可用苏丹Ⅲ染液（或苏丹Ⅳ染液）鉴定，呈橘黄色（或红色），由于脂肪遇苏丹Ⅲ染液（或苏丹Ⅳ染液）会出现红色，所以为了筛选出菌株，可将适量的试剂滴加在平板中的菌落周围，洗去浮色后，如果菌落周围的现象是出现透明圈、不出现红色圈，则说明此种菌能够分泌脂肪酶。纯化菌种时，为了对活菌进行计数，可采用稀释涂布平板法接种于新的培养基平板上。