Question

核酸检测作为确诊新型冠状病毒肺炎的金标准，写入了国家卫健委颁布的诊疗指南里，但依然出现了少数“假阴性”病例，此时采用免疫检测则可以很大程度上避免核酸检测的“假阴性”。请回答下列问题：

（1）开发核酸检测试剂盒，需要先分离毒株、获得完整基因组序列信息、设计特异性引物和探针的__________，再据此用__________方法直接人工合成特异性引物和探针。

（2）我国研发的新型冠状病毒核酸快速检测试剂盒的检测原理是：若送检样本中存在病毒，则以病毒RNA为模板，在___________酶的作用下合成cDNA，再加入互补的荧光探针、__________种引物、四种脱氧核苷酸和_________酶后，cDNA开始扩增，子链延伸至探针处，会水解探针释放出荧光基团产生荧光，荧光监测系统接收到荧光信号从而确诊。

（3）我国新型冠状病毒化学发光检测试剂盒采用的是免疫检测，其中的单克隆抗体是由经病毒抗原蛋白免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合制备的__________细胞产生的；该试剂盒能快速确诊病例，这是因为单克隆抗体具有___________________________等优点。

Answer

核苷酸序列 化学 逆转录酶 2 Taq 杂交瘤细胞 特异性强、灵敏度高、能够大量制备

【解析】

新型冠状病毒核酸检测，对于临床早发现、早诊断、早隔离、早治疗至关重要，是有效防控新冠肺炎疫情的关键技术支撑。病毒的特点就是形态非常小，在普通光学显微镜下看不到，肉眼更是无法直接观察。但每种病毒都有其独特的基因序列，通过检测病人体内的病毒核酸，就可判断病人体内是否存在病毒。病毒核酸检测试剂盒的一个优势就是研发过程很快，但前提是必须掌握一定量的病毒基因序列。一旦有了病毒基因序列，通过生物信息学分析，就可确定候选的核酸检测靶标，并进行引物和探针的设计。核酸检测试剂盒的组分中，检测引物和探针最为关键。灵敏特异的扩增引物，对检测结果的准确与否发挥着至关重要的作用。所以，一般在研发阶段都会设计多对引物探针，通过实验筛选出扩增效果最好的引物探针，组装在病毒核酸检测试剂盒中。

（1）开发核酸检测试剂盒时，需要先获得病毒完整的基因组序列信息，设计出特异性引物和探针的的核苷酸序列，再据此用化学方法直接人工合成特异性引物和探针。

（2）以病毒RNA为模板合成cDNA的过程为逆转录，需要逆转录酶的催化；利用PCR技术扩增cDNA时，需要2种引物，4种脱氧核苷酸和Taq酶。

（3）单克隆抗体是由杂交瘤细胞（经病毒抗原蛋白免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合制备）产生的；单克隆抗体特异性强、灵敏度高、化学性质单一，可以大量制备。