Question

枯草杆菌广泛分布于土壤及腐败的有机物中，某工厂为生产耐高温的淀粉酶，开展了枯草杆菌菌株的筛选、酶的固定化分析研究。请回答下列问题：

（1）本实验利用的培养基需用______________法进行灭菌，无菌技术处理除了防止实验室培养物被其他外来微生物污染外，还可______________和______________。

（2）为了酶的重复利用和节约成本，除了利用固定化酶技术之外，还可利用固定化细胞技术，与固定化酶相比，固定化细胞的优势是_____________________。固定化细胞常用的方法是______________ ，操作过程中的海藻酸钠作用是____________________________。

（3）为了分离纯化菌种，可以选择的接种方法是________（答一种方法），为了保持菌种的纯净，可以采用________的方法长期保存该菌种。

Answer

高压蒸汽灭菌 防止污染环境 防止感染操作者 制备成本更低，操作更容易 包埋法 包埋细菌（包埋剂） 平板划线法（或答“涂布平板法”） 甘油管藏

【解析】

1、平板划线法是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。在数次划线后培养，可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，这就是菌落。

2、稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落。

（1）培养基、无菌水等常采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。无菌技术处理除了防止实验室培养物被其他外来微生物污染外，还可有效避免操作者自身被微生物感染，使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理，以免对环境造成污染。

（2）与固定化酶相比，固定化细胞制备的成本更低，操作更容易，条件温和，对细胞无毒性，可催化一系列酶促反应。细胞个体较大，难以被吸附或结合，因此固定化细胞常用的方法是包埋法。海藻酸钠常被用作包埋细胞的载体。

（3）由分析可知，分离纯化菌种，可以选择平板划线法或稀释涂布平板法。对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法。