Question

下图为“DNA粗提取和鉴定”实验的相关操作；表是研究人员比较了不同贮藏条件对棉叶DNA纯度及提取率的影响结果。请回答下列问题：

不同贮藏条件	鲜叶	冷鲜3d	冷冻3d	冷冻7d	液氮7d
DNA纯度	2．00	1．91	1．92	1．73	1．69
DNA提取率	210	198	347	39	126

（DNA纯度单位：OD260/OD280值）   （DNA提取量单位：）

（1）棉叶细胞中含有DNA的细胞结构有_____________。

（2）图中①、②、③三个操作图，按照DNA粗提取操作流程的排序是_____________，三个步骤操作后均需进行过滤，完成过滤之后弃去滤液的序号是_____________。

（3）图1中①的具体操作是_____________。

（4）用二苯胺试剂鉴定，颜色最深的是表中_____________处理后提取的DNA，鉴定中的溶液颜色变化是_____________。

（5）针对第（4）小题的结果，请提出两点合理的解释_____________、_____________。

Answer

叶绿体、线粒体和细胞核 ②①③ ①和③ 取适量蒸馏水沿烧杯内壁缓缓加入，并用玻璃棒沿一个方向轻轻搅拌 冷冻3d 逐渐变蓝 在低温条件下DNA分子结构稳定 储存天数的增加导致DNA分子容易降解，所以纯度降低

【解析】

DNA的粗提取与鉴定的实验原理是：

①DNA的溶解性，DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的氯化钠溶液中的溶解度不同，利用这一特点可以选择适当浓度的盐溶液可以将DNA溶解或析出，从而达到分离的目的；

②DNA不容易酒精溶液，细胞中的某些蛋白质可以溶解于酒精，利用这一原理可以将蛋白质和DNA进一步分离；

③DNA对于酶、高温和洗涤剂的耐受性，蛋白酶能水解蛋白质，但是不能水解DNA，蛋白质不能耐受较高温度，DNA能耐受较高温度洗涤剂能瓦解细胞膜，但是对DNA没有影响；

④在沸水浴的条件下DNA遇二苯胺会呈现蓝色。

（1）棉叶细胞含有DNA的细胞结构有叶绿体、线粒体和细胞核。

（2）DNA粗提取的流程是，先用蒸馏水使细胞吸水涨破，释放出DNA，用2moL/L的NaCl溶液将DNA分子溶解，然后不断的稀释，稀释NaCl溶液的浓度，降低DNA分子溶解度，再将DNA分子溶解后加入冷的95%的酒精进行提纯，所以正确的顺序是②①③；①加入蒸馏水析出DNA分子，过滤后出去滤液，②是用蒸馏水使细胞吸水涨破，过滤后收集滤液；③是加入冷的酒精，析出DNA分子，出去滤液，所以需要出去滤液的是①和③。

（3）①是加入蒸馏水，降低NaCl的浓度，使DNA的溶解度降低，析出DNA分子，操作中取适量蒸馏水沿烧杯内壁缓缓加，并用玻璃棒沿一个方向轻轻搅拌，直至丝状物不在增加。

（4）冷冻3d处理提取的DNA量是最多的，因此用二苯胺试剂鉴定，颜色最深的是冷冻3d处理后提取的DNA，DNA的鉴定过程中颜色变化是颜色逐渐变蓝。

（5）从表格中的数据看出叶片越新鲜，DNA的纯度越高，储存温度越低DNA提取率越高，可能的原因是在低温条件下DNA分子结构越稳定，而储存天数的增加导致DNA分子容易降解，所以纯度降低。