Question

试回答下列“血红蛋白质提取与分离实验”的有关问题：

（1）血红蛋白质的提取和分离一般分为四步：_______、________、纯化、__________。

（2）对红细胞进行洗涤时应使用生理盐水而不使用蒸馏水的原因是______。

（3）图1装置的作用是________________________________。

（4）粗分离后纯化蛋白质采用的方法是___________法。装填凝胶色谱柱时，色谱柱内不能有气泡的存在，原因是______。a、b均为蛋白质分子，其中先从凝胶色谱柱中洗脱出来的是a，是因为a蛋白质分子的相对分子质量______（“大”、“小”）。

（5）图2表示电泳法分离蛋白质的结果。不同蛋白质得以分离是原因是______。

Answer

样品处理 粗分离 纯度鉴定 防止红细胞吸水涨破 去除血红蛋白中的小分子杂质 凝胶色谱 气泡会搅乱洗脱液中的蛋白质的洗脱次序，降低分离效果 大 不同蛋白质所带的电荷性质、分子大小和形状等不同，导致电泳时迁移速度不同

【解析】

1、血红蛋白的提取与分离的实验步骤主要有：
（1）样品处理：①红细胞的洗涤，②血红蛋白的释放，③分离血红蛋白。
（2）粗分离：①分离血红蛋白溶液，②透析。
（3）纯化：调节缓冲液面→加入蛋白质样品→调节缓冲液面→洗脱→收集分装蛋白质。
（4）纯度鉴定−−SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳。
2、纸层析法分离叶绿体中色素的原理：不同色素在层析液中的溶解度不同，随层析液在滤纸条上的扩散速度不同而将不同色素分离。

（1）血红蛋白质的提取和分离一般分为四步：样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定。

（2）对红细胞进行洗涤时应使用生理盐水而不使用蒸馏水的原因是防止红细胞吸水涨破。

（3）图1装置的作用是去除血红蛋白中的小分子杂质。

（4）粗分离后纯化蛋白质采用的方法是凝胶色谱法。装填凝胶色谱柱时，色谱柱内不能有气泡的存在，原因是气泡会搅乱洗脱液中的蛋白质的洗脱次序，降低分离效果。a、b均为蛋白质分子，其中先从凝胶色谱柱中洗脱出来的是a，是因为a蛋白质分子的相对分子质量大，无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快。

（5）图2表示电泳法分离蛋白质的结果。不同蛋白质得以分离是原因是不同蛋白质所带的电荷性质、分子大小和形状等不同，导致电泳时迁移速度不同。