满分5 > 高中生物试题 >

蜘蛛丝中强度最好的牵引丝由主壶腹腺蛛丝蛋白(MaSp)组成。MaSp包括MaSp...

蜘蛛丝中强度最好的牵引丝由主壶腹腺蛛丝蛋白(MaSp)组成。MaSp包括MaSp1MaSp2两个组分。完整的MaSp1蛋白可分NTRPCT三个部分。研究者以大腹园蛛MaSp1NT等为研究对象做了相关实验,以期了解大腹园蛛MaSp1的结构和成丝机理。实验流程图如图所示。请回答问题:

1)蜘蛛冻存之前通常要用灭菌蒸馏水清洗、饥饿等处理,其目的是______________;取冻存大腹园蛛的胸部组织捣碎,提取该蜘蛛的______________

2)在仅知黑寡妇蜘蛛和摩鹿加云斑蛛MaSp1基因编码序列的情况下,研究者对比两者NT中的氨基酸序列,根据其中共有的一段含有7个氨基酸的保守序列,推测对应的DNA序列,据此设计出长度为________个碱基的引物1。获取该引物常用________方法。

3)利用PCR技术扩增目的基因时,经2530轮扩增循环后,由于模板的增多,________的数量会逐渐成为制约反应持续进行的主要限制性因素。

4)流程图中的空白处指构建________,然后将该结构导入________态的大肠杆菌。

5)分离、纯化NT蛋白时,为何不直接从培养液中提取,而是将表达该蛋白的工程菌破碎?_______________________________________

 

减少外源DNA的干扰 基因组DNA 21 化学方法(人工)合成 热稳定DNA聚合酶(Taq酶) 基因表达载体( 或重组质粒) 感受 大肠杆菌(缺少信号肽、内质网、高尔基体等)不分泌NT蛋白 【解析】 1、PCR技术的基本原理利用DNA体外双链复制的原理,其特异性依赖于与靶序列两端互补的引物。 PCR由变性-退火-延伸三个基本反应步骤构成:①模板DNA的变性:模板DNA经加热至93℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备;②模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合;③引物的延伸:DNA模板-引物结合物在72℃、DNA聚合酶(如TaqDNA聚合酶)的作用下,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按碱基互补配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链,重复循环变性-退火-延伸三过程就可获得更多的“半保留复制链”,而且这种新链又可成为下次循环的模板。 2、基因工程的操作步骤:提取目的基因、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。 (1)蜘蛛冻存之前通常要用灭菌蒸馏水清洗、饥饿等处理,其目的是减少外源DNA的干扰,获取目的基因的方法包括从自然界已有的物种中分离和人工合成法,因此取冻存大腹园蛛的胸部组织捣碎,可以从中提取该蜘蛛的基因组DNA。 (2)根据题意可知,研究者对比两者NT中的氨基酸序列,根据其中共有的一段含有7个氨基酸的保守序列,推测对应的DNA序列,根据氨基酸与密码子的对应关系可知,则设计出引物的长度为7×3=21个碱基的引物1,常用化学合成法合成引物。 (3)根据以上分析可知,PCR扩增过程中需要的条件为:模板、引物、热稳定的DNA聚合酶、dNTP为反应原料等,因此经25~30轮扩增循环后,由于模板的增多,热稳定DNA聚合酶的数量会逐渐成为制约反应持续进行的主要限制性因素。 (4)识图分析可知,图纸空白处为基因表达载体的构建,基因表达载体构建完成后导入受体细胞,大肠杆菌为微生物,可以用钙离子转化法处理,使大肠杆菌处于感受态,便于吸收周围环境中的DNA分子。 (5)由于大肠杆菌为原核生物,没有内质网、高尔基体等细胞器,不能对分泌蛋白进行加工和分泌,因此大肠杆菌不能分泌NT蛋白,故分离、纯化NT蛋白时,不直接从培养液中提取,而是将表达该蛋白的工程菌破碎处理后提取。
复制答案
考点分析:
相关试题推荐

下图是泰州某中学新建的一个人工湿地:池塘边有一片芦苇滩,池塘底定植了大量睡莲,水中放养了大量鱼类。一段时间后,睡莲全部被鱼吃光,后来学校每天用食堂的剩饭、剩菜饲喂鱼苗,“水体严重富营养化”等问题又出现了。该校生物兴趣小组尝试将池塘水泵入芦苇滩以净化水质。请分析回答:

1)该池塘中所有生物可以看做是一个________。输入该生态系统的能量有_____________________________________________

2)为监测池塘水质的变化,兴趣小组在每周周六的70012001700三个时间点测定池塘水的pH值,推测pH值最高的时间点是________,原因是____________________

3)为改善池塘水质,学校每天上午900开始将池塘水泵入芦苇滩,再从出水口引回,如此循环处理6 h6 h循环水量约为池塘总水量的10%。下表是兴趣小组某天从进水口和出水口分别采集水样测定的相关指标的结果:

1100

1300

1500

进水口

出水口

进水口

出水口

进水口

出水口

总磷含量

0.39

0.36

0.35

0.31

0.39

0.34

总氮含量

2.19

2.06

2.21

2.02

2.16

1.91

化学耗氧量(COD

10.08

8.42

10.08

8.56

9.35

7.92

 

①化学耗氧量(COD)是指水体中的有机物等在规定条件下进行化学氧化过程中所消耗氧化剂的量,在一定程度上能够反映水体的污染程度。据表判断,COD值与污染程度成________

②与进水口比较,出水口的总磷、总氮含量均有所下降的原因是芦苇_________________

③除上述因素之外,芦苇滩生物净化水质的途径还有________

4)结合所学知识,请为该校改善池塘水体富营养化提出两条合理化的建议:________________________________

 

查看答案

新冠病毒(2019­nCoV)入侵人体后引起新冠肺炎。2019­nCoV有包膜,结构示意图如下图1,其中SME表示3种包膜糖蛋白,N代表核衣壳蛋白;图2是冠状病毒复制过程示意图。请据图回答:

1)糖蛋白S的基本组成单位是________________

2)机体接触2019­nCoV后,病毒依靠蛋白S识别靶细胞膜上的血管紧张素转化酶2ACE2)。与非典病毒相比,2019­nCoV蛋白SACE2的结合更紧凑,导致新冠肺炎比非典具有更强的________。部分患者出现肠道感染,推测可能是由于__________

3)图2中需要用到RNA聚合酶的过程有________(填标号),据图可以推测冠状病毒RNA________RNA(填“正链”或“负链”)。

4)病毒的感染刺激________细胞大量分泌淋巴因子,从而可能导致自身免疫损伤。

5)根据病毒蛋白S与人ACE2相互作用的分子机制,请尝试提出一个作用于ACE2来治疗新冠肺炎的方案:____________________________________

 

查看答案

真核生物大多数mRNA存在甲基化现象,甲基化位点集中在5′端,称5′帽子;3′端有一个含100200A的特殊结构,称为poly­A­尾。下图表示真核生物mRNA poly­A­尾与5′端结合的环化模型。请回答下列问题:

1)图中所涉及的过程在基因表达中称为________,该过程从mRNA________端开始。

2)经测序发现真核生物基因的尾部没有T串序列,故判断poly­A­尾不是________而来的,而是由细胞核内的腺嘌呤聚合酶在mRNA前体上依次添加________形成的。

3)据图可知,核糖体的________首先与携带甲硫氨酸的tRNA相结合,再开始后续过程,对大肠杆菌核糖体的研究表明:即使剥离其中大多数蛋白质,依然能催化肽键的形成,且空间结构研究发现催化肽键形成的活性位点附近没有氨基酸,这说明核糖体主要依赖________(物质名称)催化肽键的形成。

4)据图分析,真核生物mRNA环化能提高翻译效率的机制是________________

 

查看答案

已知豌豆(2n14)的花色受非同源染色体上的两对等位基因的控制。红花(A)对白花(a)为完全显性。B基因为修饰基因,能淡化花的颜色,BBBb的淡化程度不同,前者淡化为白色,后者淡化为粉色,对应的基因组成如下表所示。请回答问题:

花色

红色

粉色

白色

基因组成

A_bb

A_Bb

aa____BB

 

1)控制豌豆花色遗传的两对基因遵循基因的____________规律,白花豌豆的基因型有________种。

2)已知两株纯合的白花豌豆杂交得到的F1均表现为粉色,F1自交产生F2

①该杂交实验的亲本基因型为________F2中开红花个体的比例占________

②将F1测交,后代表现型及对应比例为__________________

③将F2中纯合个体杂交,F3开白花的基因型组合有________种(不考虑正反交)。

F2的开白花个体中纯合体的比例为________。让F2中开粉花的个体随机交配,子代开白花个体的比例为________

 

查看答案

铁皮石斛为药用草本植物,喜生活在阴湿环境,已被列为“濒危珍稀植物”。下图为某科研小组测定其在光照和黑暗条件下的CO2吸收速率曲线,请回答:

1)铁皮石斛叶肉细胞可以将光能转变为化学能,参与这一过程的两类色素为________

2)铁皮石斛叶肉细胞叶绿体________上的色素吸收光能,将水分解,产生的O2释放到细胞外至少需要穿过________层生物膜。

3)据图分析,铁皮石斛不同于一般植物的特点是________________。研究发现,黑暗时铁皮石斛细胞可将CO2转化为酸性物质储存起来,但不能将CO2转化为糖类等有机物,其原因是暗处缺少光反应提供的________,进而不能完成C3________等过程。

4)以铁皮石斛茎段为外植体进行植物组织培养,移栽前需将生根瓶苗打开瓶盖,移至常温下炼苗7天,炼苗的目的是________________。炼苗后,应洗去根部富含有机物的培养基,栽种在以________营养为主的普通基质上。

 

查看答案
试题属性

Copyright @ 2008-2019 满分5 学习网 ManFen5.COM. All Rights Reserved.