Question

下图是从土壤中筛选细菌的过程。请回答下列问题：

 

（1）土壤中存在能分解尿素的细菌，这些细菌中的脲酶催化尿素分解成___________。因此，图中选择培养基应以尿素为微生物营养中唯一___________。鉴别培养基还需添加酚红作___________。

（2）在向培养基接种土壤稀释液中微生物时，最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法。此外，微生物接种技术还包括___________、___________等方法。

（3）若在3个细菌培养基平板上均接种稀释倍数为10⁵的土壤样品0．1mL，培养一段时间，平板上菌落数分别为35个、33个、34个，则可推测每克土壤样品中的细菌数为___________个。 运用这种方法统计的结果往往较实际值___________（填“偏大”或“偏小”），原因是___________。

Answer

氨 氮源 指示剂 斜面接种 穿刺接种 3．4×107 偏小 个别菌落可能是由2个或多个细菌形成

【解析】

1．培养基选择分解尿素的微生物的原理：培养基的氮源为尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。
2．鉴定分解尿素的细菌：细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强。在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养细菌，若指示剂变红，可确定该种细菌能够产生脲酶，并分解尿素。
3．微生物常见的接种的方法
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

（1）土壤中存在能分解尿素的细菌，这些细菌中的脲酶催化尿素分解成氨。因此，图中选择培养基应以尿素为微生物营养中唯一氮源。鉴别培养基还需添加酚红作指示剂。

（2）在向培养基接种土壤稀释液中微生物时，最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法。此外，微生物接种技术还包括斜面接种、穿刺接种等方法。

（3）若在3个细菌培养基平板上均接种稀释倍数为105的土壤样品0．1mL，培养一段时间，平板上菌落数分别为35个、33个、34个，则可推测每克土壤样品中的细菌数为（35+33+34）÷3×105÷0.1=3．4×107个。 运用这种方法统计的结果往往较实际值偏小，原因是个别菌落可能是由2个或多个细菌形成。