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如图所示为三种质粒和一个含目的基因的DNA片段示意图。图中Ap为氨苄青霉素抗性基...

如图所示为三种质粒和一个含目的基因的DNA片段示意图。图中Ap为氨苄青霉素抗性基因,Tc为四环素抗性基因,lacZ为蓝色显色基因(产生酶能使X-gal产生蓝色的物质,使含该基因的大肠杆菌菌落呈蓝色)。图中EcoRⅠ、PvuⅠ为两种限制酶,括号内的数字表示限制酶切割位点与复制原点的距离。请据图分析并回答问题:

1)若需获得图中目的基因,可选用的限制酶是________

2)片段D是目的基因中的某一片段,下列叙述错误的有________(填字母)。

a.该图中含有两个密码子

b.图中③和④代表两个不同的脱氧核苷酸

c.若只用该片段中的3个碱基对,可以排列出43种片段

dDNA聚合酶和DNA连接酶都可作用于②处,解旋酶作用中①处

3)图中最适合作为目的基因运载体的质粒是B,质粒A缺少标记基因不能作为载体,而C质粒也不能作为载体的理由是___________________________

4)用目的基因和质粒B构建重组质粒后用EcoRⅠ完全酶切并进行电泳观察,可出现长度为11kb________kb,或者________kb________kb的片段。(重组质粒上目的基因的插入位点与EcoRⅠ的识别位点之间的碱基对忽略不计)

5)将分别用限制酶PvuⅠ切开的质粒B溶液与目的基因溶液混合,加入DNA连接酶连接后,并进行导入大肠杆菌受体细胞的操作之后,从菌落的颜色和对抗生素抗性的角度分析,受体细胞的类型有________种。若菌落表现为具有氨苄青霉素抗性、不呈蓝色,说明导入对应受体细胞的DNA为重组质粒(或质粒B—目的基因连接)或____________________________

 

PvuⅠ abc 质粒C在用和目的基因相同的限制酶切割时,复制原点会被限制酶切割,会影响重组质粒的自主复制 5.6 3.1 3.6 3 质粒B—质粒B反向连接 【解析】 1、分析图中质粒:质粒A含有EcoRⅠ和PvuⅠ的酶切位点,无标记基因;质粒B含有Ap基因和lacZ基因,且EcoRⅠ和PvuⅠ的酶切位点位于lacZ基因内;质粒C含有Ap基因和Tc基因,含有EcoRⅠ和PvuⅠ的酶切位点,且PvuⅠ的酶切位点位于复制原点内。 2、EcoRⅠ(0.7Kb)、PvuⅠ(0.8Kb)等括号内的数字表示限制酶切割的位点与复制原点的距离。 3、片段D中,①是氢键,②是磷酸二酯键。 (1)分析图可知,目的基因上有两个PvuⅠ酶切位点和一个EcoRⅠ酶切位点,而EcoRⅠ酶切会破坏目的基因D的结构,因此应选用PvuⅠ酶对其所在的DNA进行切割。 (2)a、该图为DNA片段,密码子位于mRNA上,a错误; b、④中的磷酸是其右侧脱氧核苷酸的一部分,故④不代表脱氧核苷酸,b错误; c、若只用该片段中的3个碱基对,碱基已经确定,而且是三个不同的碱基对,可以排列出3×2×1=6种片段,c错误; d、DNA聚合酶和DNA连接酶都可作用于②处的磷酸二酯键,解旋酶作用于①处的氢键,d正确。 故选abc。 (3)分析图示可知,质粒C在用和目的基因相同的限制酶(PvuⅠ)切割时,复制原点会被限制酶切割,会影响重组质粒的自主复制。 (4)分析质粒B和目的基因的图示可知,由于目的基因的长度为4.0Kb,因此用质粒B构建的重组质粒的长度为4.0Kb+2.7Kb=6.7Kb,当重组质粒被EcoRⅠ酶完全切割后,会出现两个不同长度片段,若是正向连接(目的基因上的EcoRⅠ酶切位点与质粒B上的EcoRⅠ酶切位点的距离较近),会得到0.1Kb+1.0Kb=1.1Kb和6.7Kb-1.1Kb=5.6Kb的两个片段;若是反向连接(目的基因上的EcoRⅠ酶切位点与质粒B上的EcoRⅠ酶切位点的距离较远),则会得到0.1Kb+3.0Kb=3.1Kb和6.7Kb-3.1Kb=3.6Kb的两个片段。 (5)将分别用限制酶PvuⅠ切开的质粒B溶液与目的基因溶液混合,加入DNA连接酶连接后,可得到质粒自身环化形成的普通质粒、重组质粒和目的基因自身连接的DNA环三种类型。若菌落表现为具有氨苄青霉素抗性、不呈蓝色,说明导入对应受体细胞的DNA上有Ap基因、无lacZ基因,则可能为重组质粒(质粒B—目的基因连接)或质粒B—质粒B反向连接。
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人类免疫缺陷病毒(HIV)的外膜是类脂包膜,来自宿主细胞,并嵌有病毒的蛋白GP120GP41。如图为HIV侵染T淋巴细胞的过程图,请回答下列问题:

1HIV在结构上与T淋巴细胞最显著的差异是____________ 

2HIVGP120蛋白能特异性结合T淋巴细胞表面的CD4受体,病毒外膜可与细胞膜融合并以核衣壳的形式进入细胞,该过程体现了细胞膜的____功能。分析组成病毒外膜的化合物成分主要是____________ 

3HIV核衣壳进入细胞后逆转录形成DNA,通过____(填结构)进入细胞核后在整合酶的作用下整合到人T细胞的DNA分子上,该过程中整合酶类似于基因工程中_________酶的作用。 

4)入侵人体的HIV,大多数被免疫系统摧毁,在这一过程中,人体参与的免疫类型有________________。人体一旦感染HIV后很难彻底清除,原因是________________________ 

5)假如你是药剂师,想研制治疗艾滋病的药物,请据图分析药物治疗艾滋病的方向:______________________________________________ (至少写出两种方向)。

 

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蝇是常用的遗传学实验材料,其体色有黄身(H)、黑身(h)之分,翅型有长翅(V)、残翅(v)之分。现用两种纯合果蝇杂交,F2出现4种类型且比例为5:3:3:1,已知果蝇有一种精子不具有受精能力。回答下列问题: 

(1)果蝇体色与翅型的遗传遵循_______________定律。

(2)不具有受精能力精子的基因组成是___________。F2黄身长翅果蝇中两对基因均杂合的比例为____________________

(3)若让F2黑身长翅果蝇自由交配,则子代的表现型及比例为___________________

(4)现有多种不同类型的果蝇,从中选取亲本通过杂交实验来验证上述不能完成受精作用的精子的基因型。

①杂交组合:选择________________________________________的果蝇进行杂交。

②结果推断:若后代出现________________,则不具有受精能力精子的基因型为HV。

 

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白色念珠菌是存在于人体上呼吸道和肠道黏膜中的真菌,当机体免疫功能下降时,菌丝大量生长,侵入细胞引起疾病。图1F1F0两部分组成V蛋白,对菌丝形成有重要作用。

1)图1ATP的合成反应体现了膜蛋白的_____功能,其作用机理是__________ATP分子的结构简式是_______

2ATP合成酶由突出于膜外的F1和嵌入膜内的F0两部分组成。F1负责ATP的合成或水解,F0是一个疏水蛋白复合体,形成跨膜H+通道,当H+顺浓度梯度穿过ATP合成酶时,ADPPi结合形成ATP(其过程如图1所示)。据图推测,在真核细胞中含有该酶的生物膜有_____________(至少填出两种)。如果图1表示叶绿体内合成ATP的过程,若膜两侧的H+浓度梯度突然消失,其他条件不变,短时间内暗反应中的C5的量会____(填“增加”“减少”或“不变”)。 

3)科研人员为研究不同浓度药物D(一种ATP酶抑制剂)对Ⅴ蛋白的作用,将Ⅴ蛋白与反应缓冲液混合,实验组加入用DMSO溶解的不同浓度的药物D溶液,室温孵育10min之后向反应体系中加入ATP溶液,室温反应30min。再向反应体系中加入孔雀绿试剂(可与无机磷反应呈现绿色),定量分析反应体系的绿色深浅,得到如图2所示结果。

①实验中测定的绿色深浅,可反映出_______的量,从而得到V蛋白活性。 

②本实验以对照组数据作为V蛋白活性相对值1,对照组的处理是__________,室温孵育10 min,向反应体系中加入ATP溶液,室温反应30 min 

③实验结果说明________

 

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利用相关工程技术可以获得抗黑腐病杂种黑芥—花椰菜植株,已知野生黑芥具有黑腐病的抗性基因,而花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病,技术人员用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化,并丧失再生能力,再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合,流程如下图。

据图回答下列问题。

(1)该过程用到的工程技术有____________________ 

(2)过程①所需的酶是____________,过程②PEG的作用是___________,经过②操作后,需筛选出融合的杂种细胞,显微镜下观察融合的活细胞中有供体的叶绿体存在,可作为初步筛选杂种细胞的标志。 

(3)原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压,其作用是_____________。原生质体经过细胞壁再生,进而分裂和脱分化形成_________ 

(4)若分析再生植株的染色体变异类型,应剪取再生植株和双亲植株的根尖,制成装片,然后在显微镜下观察比较染色体的_________;将杂种植株栽培在含有________的环境中,可筛选出具有高抗性的杂种植株。

 

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辣椒是我国栽培面积最大的蔬菜作物之一。图1是辣椒植株光合作用示意图;图2是将辣椒植株置于CO2浓度适宜、水分充足的环境中,温度分别保持在15℃、25℃和35℃下,改变光照强度,测定的CO2吸收速率;图3科研人员在不同条件下测定发育良好的绿萝叶片光合速率变化情况,请据图

1)图1中乙表示_____________,若停止甲的供应,一段时间后氧气的产生速率将会_________(填增大减小基本不变)。

2)图2 A点时,该植物叶肉细胞产生ATP的场所是____________。当光照强度大于8时,25 ℃与15℃条件下有机物的合成速率分别为M1 M2,结果应为M1___M2(填“=”)。

3)图3ab段限制叶片光合速率的主要环境因素包括________。其他条件不变,若a点时的光照突然增强,短时间内叶绿体内C3C5含量将依次____(上升、下降)。

4)图中cd对应时段,植物体内有机物总量的变化情况是___,净光合速率由e点急剧下降到f点的主要原因是_______

 

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