Question

漆酶是一种胞外氧化酶，具有很强的降解木质素的能力，可用于处理造纸厂排放的污水。研究人员从不同环境地表上采集土壤、腐烂的树枝等接种到MEA培养基上，经过一系列分离纯化，最终筛选出了高产漆酶的白腐真菌。请回答下列问题：

（1）MEA培养基用于白腐真菌的筛选，则培养基中应加入链霉素以抑制__________的生长，加入了链霉素的培养基属于__________培养基。

（2）将MEA培养基上疑似白腐真菌的菌株用平板划线接种到新的培养基上，培养一段时间后会观察到菌落。菌落的含义是__________。

（3）实际生产中，通过培养白腐真菌获取的漆酶蛋白往往与其它物质混合在一起。因此，得到漆酶的粗提取物后，先要通过__________和__________法进行纯化，再通过__________鉴定漆酶的纯度。

（4）用于生产实践前，还需要测定纯化后的漆酶的活性。漆酶的活性以__________来表示。

（5）游离的漆酶稳定性差，在环境中易受温度、pH等因素的影响，且不易分离和回收，这在一定程度上限制了漆酶的工业化应用。请根据所学知识提出一项解决措施：__________。

Answer

细菌 选择 由一个细胞在适宜固体培养基上繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体 透析 凝胶色谱法 电泳 单位时间木质素的减少量 利用固定化技术固定白腐真菌细胞（或固定漆酶）

【解析】

1、从混合样品中获得某种微生物的方法通常有两种：

（1）可利用该分离对象对某一营养物质有一“嗜好”的原理，专门在培养基中加入或不加该营养物质，从而使它成为一种选择培养基（如在含高浓度NaCl的培养基上分离金黄色葡萄糖球菌，在不含N的培养基上分离圆褐固氮菌）；或根据分离对象对pH、温度和氧气浓度的喜好，改变培养环境的理化性质，使环境条件最适宜该微生物的生存，从而达到分离的目的。

（2）可利用该分离对象对某种抑菌物质的抗性，在混合培养物中加入该抑制物，经培养后，原来占优势的微生物生长受抑制，而分离对象却可乘机大大增殖，使之在数量上占优势（如在加入青霉素的培养基上分离真核微生物）。

2。菌落菌落是指一个细菌或真菌在适宜的培养基上繁殖后形成的肉眼可见的集合体（细菌或真菌集团），其特征包括菌落大小、形状、隆起程度、颜色、透明度。

3、分离纯化酶的方法是凝胶色谱法和透析法，而鉴定该酶纯度的方法是SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法。固定化酶可以提高酶的利用率，常用的方法有物理吸附法和化学结合法。

（1）MEA培养基用于真菌的筛选，则培养基中应加入链霉素以抑制细菌的生长，这类在混合培养物中加入该抑制物，以筛选某一类微生物的培养基属于选择培养基；

（2）菌落的含义是由一个细胞在适宜固体培养基上繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体；

（3）得到漆酶的粗提取物后，可以根据漆酶的相对分子质量，通过透析法和凝胶色谱法进行纯化，再通过电泳鉴定漆酶的纯度；

（4）酶的活性以单位时间反应物的减少量或产物的增加量来表示，漆酶的活性以单位时间木质素的减少量来表示；

（5）为提高漆酶稳定性和利用率，可以利用固定化技术固定漆酶或白腐真菌细胞。