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基因工程又称基因拼接技术和DNA重组技术,是以分子遗传学为理论基础,以分子生物学...

基因工程又称基因拼接技术和DNA重组技术,是以分子遗传学为理论基础,以分子生物学和微生物学的现代方法为手段。如图是基因工程示意图,请据图回答下列问题:

1)利用PCR技术对目的基因进行扩增时,需加入____________酶。该技术依据的原理是____________,在操作步骤中需要加热至9095℃使____________,然后降温至5560℃,使________________________

2)进行①过程时,需用________________________酶切开载体以插入目的基因。若要使目的基因在受体细胞中表达,需要导入基因表达载体,而不是直接导入目的基因,其原因是:________________________________________________(答出两点即可)。

3)若图中宿主细胞为大肠杆菌,一般情况下②过程采用____________处理大肠杆菌,使其成为感受态细胞

4)真核生物基因(目的基因)在大肠杆菌细胞内表达时,表达出的蛋白质可能会被降解。为防止蛋白质被降解,在实验中应选用________________________缺陷型的大肠杆菌作为受体细胞,并在蛋白质纯化的过程中应添加蛋白酶的抑制剂。

 

具热稳定性的DNA聚合酶(Taq酶) DNA半保留复制 DNA解旋 引物结合到互补DNA链 限制(或限制性核酸内切) 目的基因无复制原点、目的基因无表达所需启动子目的基因无表达所需的终止子 Ca2+ 蛋白酶 【解析】 基因工程技术的基本步骤: (1)目的基因的获取:方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。 (2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。 (3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。 (4)目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术;③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。 (1)利用PCR技术扩增目的基因时,需要特殊的耐高温的DNA聚合酶(Taq酶);PCR的原理是DNA的半保留复制;其具体操作是将DNA分子加热至90~95℃使DNA解旋;然后降温至55~60℃,使引物结合到互补DNA链。 (2)构建基因表达载体,需要用限制酶或限制性核酸内切酶切开载体以插入目的基因;由于目的基因无复制原点、目的基因无表达所需启动子,目的基因无表达所需的终止子,所以不能直接导入目的基因。 (3)如果受体细胞是大肠杆菌需要用Ca2+处理大肠杆菌。 (4)蛋白质可以被蛋白酶分解,所以为防止蛋白质被降解,可以选用蛋白酶缺陷型的细菌作为受体细胞。
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考点分析:
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酸奶是牛奶经过乳酸菌发酵制成的。乳酸菌可将牛奶中的乳糖转化为乳酸,从而减轻人群某些个体的乳糖不耐受症状。请回答问题:

1)为鉴别市售酸奶中的菌种,应该采用________法或稀释涂布法在固体培养基上进行接种,观察所获得单菌落的特征。在接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先培养一段时间,这样做的目的是___________________

2)采用平板划线法分离水样中的乳酸菌。操作时,接种环通过_________灭菌,在第二次及以后划线时,总是从__________开始划线,目的是将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落。

3)某同学在配制平板时加入(CaCO3),从而成功筛选出能产生乳酸的菌株,其筛选依据的原理是_____________________________。并且单菌落周围_________________越大,说明该菌株产生乳酸的能力越强。

4)发酵后期,当酸奶含量达到1.2%以上时,发酵速度逐渐变缓甚至停止,主要原因是_____________________

5)含有抗生素的牛奶不能发酵成酸奶,其原因是_____________________

 

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某闭花授粉植物,茎的高度和花的颜色遗传符合自由组合定律,现以矮茎紫花的纯合品种作母本,以高茎白花的纯合品种作父本进行杂交实验,在相同环境条件下,结果发现F1中只有一株表现为矮茎紫花(记作植株A),其余均表现为高茎紫花。让F1中高茎紫花自交产生F2有高茎紫花∶高茎白花∶矮茎紫花∶矮茎白花=272197。请回答:

1)由杂交实验结果F2中高茎∶矮茎=31,可推测茎的高度受______________对等位基因控制;由杂交实验结果F2中紫花∶白花=97,可推测花的颜色受___________对等位基因控制。

2)在F2中矮茎白花植株的基因型有_________种,其中纯合子比例占_________

3)据分析,导致出现植株A的原因有两个:一是母本发生了自交,二是父本的某个花粉中有一个基因发生突变。为了确定是哪一种原因,让植株A自交,统计子代的表现型及比例。

若子代的性状为__________________,则是原因一。若子代的性状为矮茎紫花∶矮茎白花=__________________,则是原因二。

 

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某湿地生态系统中,除分解者外,仅有甲、乙、丙、丁、戊5个种群,调查得知,该生态系统有4个营养级,营养级之间的能量传递效率为10%20%,且每个种群只处于一个营养级。下表为该生态系统中一年内输入各种群的能量数值,表中能量数值的单位相同,回答下列相关问题:

种群

能量

3.56

12.8

10.30

0.48

226.50

 

1)该生态系统中,处于第二营养级的生物是__________________

2)生态系统的主要功能包括物质循环、能量流动和__________________等功能。碳循环对生物和生态系统具有重要意义,碳在无机环境和生物群落之间主要以_________________的形式进行循环。

3)该生态系统通过多年演替,生物多样性增加,其中芦苇、菖蒲、碱茅等植物呈散乱、交错分布状态,从群落的结构角度看,这属于群落的_________结构。这样的分布给该湿地生态系统增添了旅游观光等多方面的资源,体现了生物多样性的__________价值。

 

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恒温动物的体温存在调定点机制,即有一个确定的数值(如人体为37℃),若体温偏离这一数值,机体就会启动相应的调节机制。回答下列问题:

1)当突然受到寒冷刺激时,人体会打寒战(骨骼肌战栗),请写出人体打寒战时的反射弧(用文字和表示):_____________________________

2)寒冷环境下,肾上腺素和甲状腺激素分泌增加,促进机体加快代谢,增加产热,这体现了激素之间具有___________作用。肾上腺素也参与血糖调节,与胰岛素有拮抗作用,因而肾上腺素会使血糖浓度______________(填“升高”或“降低”)。

3)感染新型冠状病毒后会引起发烧症状,其机制是:病毒刺激机体细胞产生致热性细胞因子,作用于下丘脑,将调定点数值上调,引起人体的____________产生热觉。此时人体代谢活动增强,释放更多的能量使病毒灭活。在各个器官、系统的协调活动下,发热病人通过______________调节网络,使调定点恢复,从而维持内环境稳态。

 

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人参为伞形目五加科人参属多年生草本植物,喜阴凉,怕直射阳光,是闻名遐迩的“东北三宝”之一。某小组研究了遮阴(30%自然光照)处理对人参光合作用的影响,旨在为人参栽培提供理论依据,测定的各项数据如下,请据此回答问题。

处理

叶绿素a

叶绿素b

类胡萝卜素

对照

0.45

0.13

0.32

遮阴

0.52

0.17

0.38

 

 

遮阴对人参中片光合色素含量的影响(mg/g

 

1)由表中数据可以得出,遮阴能通过提高人参叶片中__________________的含量,进而对环境的适应。在色素提取过程中,若未加碳酸钙,提取量影响最小的色素是____________

2)净光合速率测定一般是测定单位时间内气体的变化情况,除图2中测定的指标(单位时间CO2的吸收)外,净光合速率还可通过测定____________________________来表示。对照组中,人参净光合速率曲线呈现“双峰型”,相对于9h11h时植物叶肉细胞中C3含量______________(上升、不变或下降)。

3)实验操作过程中,遮光处理可能会影响植物的环境温度,图2中两曲线交点之一为A,此时对照组和遮光组有机物制造速度不一定相等,试述其原因:______________

 

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