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为培育含油量高的油菜,研究人员尝试利用基因工程等技术获得了转基因油菜品种。回答问...

为培育含油量高的油菜,研究人员尝试利用基因工程等技术获得了转基因油菜品种。回答问题:

1)研究人员依据基因的已知序列设计引物,采用PCR技术从陆地棉基因文库中获取酶D基因,从拟南芥基因中获取转运肽基因,所含限制酶(Cla ISac IXba I)的酶切位点如图甲所示。

若用____________________________酶处理酶D基因和转运肽基因后,可得到A端与______________端(填图中字母)相连的重组基因。

2)将上述重组基因进一步处理,插入图乙所示T质粒的T-DNA中,T-DNA上有______________限制酶切位点,构建______________并导入农杆菌中。将获得的农杆菌接种在含______________的固体平板上培养得到含重组基因的单菌落,再利用液体培养基震荡培养,可以得到用于转化的侵染液。

3)剪取油菜的叶片放入侵染液中一段时间,此过程的目的是______________,进一步筛选后获得转基因油菜细胞,该细胞通过______________技术,可培育成转基因油菜植株,其主要原理是____________

 

ClaⅠ DNA连接 D SacⅠ、XbaⅠ 基因表达载体 四环素 利用农杆菌将重组基因导入油菜细胞 植物组织培养 植物细胞的全能性 【解析】 基因工程技术的基本步骤: (1)目的基因的获取:方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成; (2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等; (3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样.将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法; (4)目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术;③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。 2.植物组织培养的大致过程是:在无菌条件下,将植物器官或组织(如芽、茎尖、根尖或花药)的一部分切下来,放在适当的人工培养基上进行培养,这些器官或组织就会进行细胞分裂,形成新的组织。不过这种组织没有发生分化,只是一团薄壁细胞,叫做愈伤组织。再适合的光照、温度和一定的营养物质与激素等条件下,愈伤组织便开始分化,产生出植物的各种器官和组织,进而发育成一棵完整的植株。该过程的原理是植物细胞的全能性。 (1)由图示的酶D基因和转运肽基因两端的限制酶切位点可知,两种基因两端都有限制酶ClaⅠ的酶切位点,因此可用ClaⅠ酶和DNA连接酶处理酶D基因和转运肽基因后,可将酶D基因A端与转运肽基因的D 端相连的重组基因。 (2)要将上述经过进一步处理重组基因,插入图乙所示T质粒的T-DNA中,则需要T-DNA上有SacⅠ、XbaⅠ限制酶切位点,经过限制酶和DNA连接酶处理后,获得目的基因表达载体并将其导入农杆菌中。由于重组质粒中含有抗四环素的基因,因此可将获得的农杆菌接种在含四环素的固体平板上筛选并培养得到含重组基因的单菌落,然后将获得的目标菌种进行大量培养。 (3)剪取油菜的叶片放入侵染液中一段时间,侵染液中有带有目的基因的农杆菌,从而实现利用农杆菌将重组基因导入油菜细胞的目的,然后再筛选出成功转化的油菜细胞,对含有目的基因的油菜细胞利用植物组织培养技术,培育成转基因油菜植株,利用植物组织培养技术成功获得转基因植株的理论基础是植物细胞的全能性。
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考点分析:
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随着垃圾分类实行,餐厨垃圾高效处理迫在眉睫。餐厨废液中含有淀粉、蛋白质等有机物能够被微生物分解并利用。回答下列问题。

1)传统餐厨垃圾主要以填埋、焚烧等方式进行处理,此种方式不可取的原因是____________

2)为探究处理餐厨垃圾的适宜方式,研究者进行了如下实验。

①以某食堂提供的午餐、晚餐残余混合物为材料,制成4种不同浓度的发酵液。

②将取自某污水处理厂的菌种加入发酵罐中,间隔不同时间分别加入等量不同浓度的发酵液,在厌氧条件下进行发酵。

35℃下发酵并测定甲烷的产率,结果如下图。据图分析,你认为对餐厨垃圾较为适宜的处理及依据是_________________

3)为探究圆褐固氮菌和巨大芽孢杆菌处理某餐厨垃圾废液的最佳接种量比,来制备微生物菌剂,研究者做了如下实验:

①将两种菌液进行不同配比分组处理如下表所示:

编号

R0

R1

R2

R3

圆褐固氮菌:巨大芽孢杆菌

1:0

0:1

1:1

2:1

 

将上表菌液外别接种于100mL某餐厨垃圾废液中进行振荡培养,振荡处理的目的是________________。本实验还需设置对照组为______________

②培养3天后测定活菌数,取一定量菌液进行______________稀释,然后分别取0.1ml的菌液采用______________法接种于基本培养基中培养。进行计数时,可依据______________对两种菌进行区分,并选取菌落数在______________内的平板。实验结果表明,两菌种接种量比例为1:1时,废液中两种菌种的有效活菌数能够实现同步最大化。

 

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果蝇是遗传学研究中常用的模式生物。为研究果绳致死原因,科研人员利用果蝇的紫眼卷翅品系和红眼直翅品系做了以下实验。回答下列问题。

1)果蝇适合做遗传学材料的原因:____________

2)红眼为____________性状,卷翅基因位于____________染色体上。

3)亲代中的卷翅个体是杂合子,判断依据是____________,卷翅基因纯合会导致果蝇死亡,理由是____________

4)科研人员又让亲代的紫眼卷翅果蝇品系连续自交多代,发现其后代始终保持卷翅,没有直翅个体出现。有人提出2种假设:

假设一:直翅基因纯合致死。

假设二:在同源染色体中,紫眼卷翅果蝇品系中卷翅基因(Cy)所在染色体对应的另一条染色体上也存在1个隐性致死基因(lethal),它的纯合子不能存活(如下图)。

①你支持哪种假设?____________,理由是____________

②依据上述你支持的假设,如果F1红眼卷翅果蝇相互交配后代的表现型及比例为____________,说明控制翅型的基因和控制眼色的基因位于非同源染色体上。

 

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内蒙古草原在上世纪90年代末,由于连年干早、过度放牧等原因,以羊草、克氏针第等为主的典型草场发生退化,退化草地中的冷蒿种群不断扩展形成冷嵩草原。近年来,内蒙古实施草原保护工程,草原植被盖度(植物茎叶垂直投影面积与该地区面积之比)逐步提高。回答下列问题。

1)草地退化过程中的冷蒿等毒杂草逐渐成为优势种的过程称为_______________,使入侵地生态系统的_______________发生改变,破坏了原有的稳态。

2)有研究表明冷蒿可向环境释放具有化感作用的代谢产物,影响周围植物的正常生长。研究者利用不同浓度的冷蒿茎叶水浸出液处理3种伴生植物幼苗,实验结果见下图。

①据图分析,冷蒿释放的化感物质对糙隐子草和克氏针茅幼苗根生长的影响效果不同,理由是________

②若在以上实验的基础上进一步研究冷蒿不同部位化感物质的作用的强弱,应再取冷蒿不同部位制成浸出液,浸出液的浓度应为________________

3)实施草原保护工程中需要进行植被调查,在调查克氏针茅草密度时,通常应____________取样,适当____________(填“扩大”或“减少”)样方的面积。为了恢复和治理草场退化,同时实现生态效益和经济效益的双赢,请提出一条具体措施____________

 

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有丝分裂中染色体的正确分离需要细胞内的监控机制来保证,如下图所示。纺锤体组装检验点依赖SAC蛋白(该机制的重要蛋白质),它监控着纺锤丝与着丝粒之间的连接。

1)细胞增殖具有周期性,分裂间期进行的物质准备主要是_______________

2)图A细胞处于有丝分裂的_______________期,结构①是_______________

3)如图所示,②表示染色体的_______________,一开始SAC蛋白位于②上,如果②_______________SAC蛋白会很快失活并脱离②,当所有的SAC蛋白都脱离后,细胞进入图D所示的时期,APC被激活。

4)此机制出现异常,经常会导致子细胞中染色体数目改变,请结合已有知识解释本检验机制对有丝分裂正常进行的意义_____________________________________________

 

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干旱条件下,拟南芥叶、根细胞中溶质浓度增大,使叶片中的脱落酸(ABA)含量增高,导致叶片气孔开度减小,光合色素的含量下降,从而引起光合作用速率下降。回答下列问题。(气孔阻力大小与气孔的开闭有关,气孔全开时阻力最小)

1)叶绿体中的光合色素分布在类囊体膜上,能够_______________和转化光能。光反应阶段生成的ATP[H]参与在_______________(场所)中进行的C3_______________过程,该过程的产物可以在一系列酶的作用下转化为蔗糖和淀粉。

2)科研人员进行了相关实验研究,结果如图所示。

ABA是细胞之间传递_______________的分子,可以调节气孔开闭。

②由图可知,干旱处理会降低植物的光合作用,恢复供水则有利于光合作用,理由是_________

③据图结果推测:对气孔调节功能丧失突变体施加一定浓度的ABA后,与对照组相比,如果实验结果为_______________,则说明该突变体的气孔开闭异常是ABA合成缺陷导致。

3)有研究表明:在干旱条件下,ABA浓度与光合色素降解程度呈正相关。请以拟南芥的ABA缺失突变体(不能合成ABA)为材料,设计实验来验证这一结论。要求简要写出实验思路和预期结果。______(光合色素含量的测定方法不作要求)

 

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