Question

佩戴口罩是预防病原体感染的有效措施。某研究小组对非灭菌的一次性口罩中的微生物进行检测，通过分析微生物的种类和数量来确定口罩的合格性。回答下列问题。

（1）从包装中取样，准确称取10g(近似10mL)样品。剪碎后加入到90ml灭菌生理盐水中，充分混匀，得到一个生理盐水样液。待上述生理盐水样液自然沉降后取上清液作菌落计数。取4个培养基，进行____灭菌处理，待冷却后采用____法分别接种0．1ml样液，放入恒温培养箱中培养一段时间后，平板上长出的菌落数分别为31、42、356和35，那么1g口罩样品中细菌数量为____。根据《中华人民共和国医药行业标准》对非灭菌一次性口罩的微生物指标要求（如表），该研究小组检测的口罩_________（填是或否）合格。口罩微生物指标

细菌菌落总数 CFU/g	大肠杆菌	绿脓杆菌	金黄色葡萄球菌	浓血性链球菌	真菌
≤100	不得检出	不得检出	不得检出	不得检出	不得检出

（2）为确定检测样液中大肠杆菌数目，需在培养基中加入______用于鉴别，统计培养基上____（颜色）菌落的数目。

（3）若要对口罩中的金黄色葡萄球菌进行检测，将样液接种到甘露醇高盐琼脂培养基上培养，此培养基属于____培养基。培养一段时间后，该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养，结果发现：振荡培养的细菌比静止培养的细菌生长速度快。分析其原因是_________

Answer

高压蒸汽 稀释涂布平板否 3600 否 伊红美蓝 （紫）黑色 选择 振荡培养能提高培养液中溶解氧的含量，同时可以使菌体与培养液充分接触，提高营养物质的利用率

【解析】

1、微生物常见的接种的方法：

①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养；在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落；

②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

2、培养基按功能分为选择培养基和鉴别培养基：

①选择培养基：培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物生长，培养、分离出特定的微生物（如培养酵母菌和霉菌，可在培养基中加入青霉素；培养金黄色葡萄球菌，可在培养基中加入高浓度的食盐）；

②鉴别培养基：根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品，鉴别不同种类的微生物，如可用伊红-美蓝培养基鉴别饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌（若有，菌落呈深紫色，并带有金属光泽）。

（1）对培养基进行灭菌应该使用高压蒸汽灭菌处理。接种微生物常用平板划线法和稀释涂布平板法，其中稀释涂布平板法可用于微生物的计数，因此该小组采用稀释涂布平板法接种，以检测样液中的细菌含量。培养基上长出的菌落数分别为31、42、356和35，其中培养基中菌落数为356的一组与其他组数量差别太大，且不在30~300之间，需要舍弃，所以培养基上平均菌落数为（31+42+35）/3=36，且由于对应的稀释倍数为10，样液为0.1mL，故每克样品中细菌数量为36/0.1×10=3600。根据题意可知，1g样品中细菌菌落总数不高于100才算合格，因此该研究小组检测的口罩是不合格的。

（2）检测样液中大肠杆菌数目，需接种于伊红美蓝培养基培养，在该培养基上大肠杆菌的菌落呈现（紫）黑色，可根据培养基上（紫）黑色菌落的数目，计算出样液中大肠杆菌的数目。

（3）金黄色葡萄球菌可以在高盐环境中生存，因此在培养基中添加高浓度氯化钠可以对金黄色葡萄球菌进行选择，属于选择培养基。振荡培养能提高培养液的溶解氧的含量，同时可以使菌体与培养液充分接触，提高营养物质的利用率，因此，振荡培养的细菌比静止培养的细菌生长速度快。