Question

科学家采用转基因体细胞克隆技术获得转基因绵羊，以通过乳腺生物反应器生产人—抗胰蛋白酶，其技术路线如图：

回答下列问题：

（1）基因表达载体应当包括______，构建基因表达载体常用的酶是______，常用载体有________。

（2）核移植的受体应选用______期卵母细胞，之后通过______（写出一种具体方法）激活受体细胞使其完成细胞分裂和发育进程。

（3）进行胚胎移植时，胚胎应发育到______阶段，移植的方法有______。为一次性获得多个体，可使用胚胎分割技术，在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意________。

Answer

启动子、终止子、目的基因 限制性核酸内切酶、DNA连接酶 质粒、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒 MⅡ 电脉冲、钙离子载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂 桑椹胚或囊胚 手术法和非手术法 将内细胞团均等分割

【解析】

（1）基因表达载体的构建（基因工程的核心）目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。组成：目的基因、启动子、终止子、标记基因、复制原点；启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质；标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的受体细胞筛选出来；（2）动物核移植是将动物的一个细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。原理：动物细胞核具有全能性；（3）胚胎移植是指将雌性动物体内的早期胚胎，或者通过体外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其它雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术。转基因、核移植，或体外受精等任何一项胚胎工程技术所生产的胚胎，都必须经过胚胎移植技术才能获得后代，是胚胎工程的最后一道“工序”。（4）分析题图可知：转基因绵羊涉及的技术手段有转基因技术、核移植、胚胎移植，据此答题。

（1）基因表达载体的组成包括：目的基因、启动子、终止子、标记基因等；构建基因表达载体常用的工具酶是限制酶和DNA连接酶；常用的载体有质粒、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒。

（2）动物细胞的核移植到一个去核的MII卵母细胞中；核移植的过程中，用物理或化学方法（如电脉冲、钙离子载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等）激活受体细胞，使其完成细胞分裂和发育进程。

（3）进行胚胎移植时，胚胎应发育到桑椹胚或囊胚阶段，移植的方法有手术法和非手术法。为一次性获得多个体，可使用胚胎分割技术，在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。