Question

同学们利用葡萄汁进行发酵实验时，发现有一瓶葡萄醋的风味非常独特，猜测里面可能有一种特殊的醋酸菌，为分离出该菌进行了一系列的实验｡请回答下列相关问题：

（1）葡萄压榨成葡萄汁密封后会产生酒味，起关键作用的微生物是____________，该发酵过程要注意进行排气是因为______________________｡此时向发酵液中滴加___________________，会观察到灰绿色｡

（2）同学们为了将这种特殊的醋酸菌分离出来，使用________________法将发酵液接种在培养基上，得到比较纯净的菌落｡接种过程中，操作要在酒精灯火焰附近进行的原因是_________________｡

（3）同学们根据培养出来的菌落的发酵效果选出合适的菌种｡为了反复使用这些菌种进行发酵，同学们使用______________法对细胞进行固定化，该方法常用的载体有______________________(写出三种)等｡

Answer

酵母菌 酵母菌进行发酵（无氧呼吸）的过程会产生CO2，会使发酵罐的气压过大 酸性的重铬酸钾溶液 平板划线或稀释涂布平板 酒精灯火焰附近能形成无菌区，防止接种过程中有杂菌污染 包埋 明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素和聚丙烯酰胺

【解析】

1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型．果酒制作的原理：

（1）在有氧条件下，反应式如下：；

（2）在无氧条件下，反应式如下：。

2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型；果醋制作的原理：

当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。

3、固定化技术包括包埋法、物理吸附法和化学结合法（交联法）；由于细胞相对于酶来说更大，难以被吸附或结合，因此多采用包埋法；酶小容易从包埋的材料漏出，一般采用化学结合法和物理吸附法。

（1）酒精的产生是利用酵母菌的无氧呼吸；酵母菌在发酵过程中会产生CO2，使发酵罐的气压过大，所以要注意排气；酒精和酸性的重铬酸钾溶液反应生成灰绿色。

（2）分离菌种的方法有平板划线法和稀释涂布平板法；酒精灯火焰附近能形成无菌区，防止接种过程中有杂菌污染，所以接种过程需要在酒精灯火焰附近。

（3）对细胞固定化采用包埋法，包埋法的材料有明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素和聚丙烯酰胺。