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人乳铁蛋白是乳汁中一种重要的非血红素铁结合糖蛋白。乳铁蛋白不仅参与铁的转运,而且...

人乳铁蛋白是乳汁中一种重要的非血红素铁结合糖蛋白。乳铁蛋白不仅参与铁的转运,而且具有广谱抗菌抗氧化、抗癌、调节免疫系统等强大生物功能。如图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的过程。图中tetR表示四环素抗性基因,ampR表示氨苄青霉素抗性基因,BamHIHindⅢ、SmaI直线所示为三种限制酶的酶切位点。据图回答:

1)若用PCR技术扩增人乳铁蛋白基因,其前提条件是有一段____________,以便合成相应的引物,合成的引物能与待扩增区段____________(中间/两端/左端/右端)的DNA序列彼此互补。

2)图中将人乳铁蛋白基因插入载体,需用____________限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含____________的培养基上进行。经过两种培养基培养后再从____________处(填字母),挑出大肠杆菌扩增带有外源DNA的重组载体。为使人乳铁蛋白基因在牛的乳腺细胞中特异性表达,应在基因的上游插入____________

3)过程②的代孕牛需要进行____________处理。若需获得多头转基因牛可对早期胚胎进行分割,对囊胚进行分割时需要注意____________

4)为检测转基因牛的乳汁中是否含有人乳铁蛋白,可采用____________技术。

 

人乳铁蛋白基因(目的基因)的核苷酸序列 两端 HindⅢ和 Bam H I 氨苄青霉素 D 牛乳腺蛋白基因的启动子等调控组件 同期发情 将内细胞团均等分割 抗原抗体杂交 【解析】 基因工程技术的基本步骤: (1)目的基因的获取:方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。 (2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。 (3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样.将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。 (4)目的基因的检测与鉴定: 分子水平上的检测: ①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术; ②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术; ③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。 个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。 (1)用PCR技术扩增目的基因的前提条件是有一段已知目的基因的核苷酸序列,以便合成相应的引物,引物是成对存在,能与待扩增区段两端的DNA序列彼此互补。 (2)由图可知,人乳铁蛋白基因两端及载体都有HindⅢ和 Bam H I限制酶切点,故要将人乳铁蛋白基因插入载体,需用HindⅢ和 Bam H I限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。重组载体的四环素抗性基因已破坏,标记基因只有氨苄青霉素抗性基因,可在含氨苄青霉素的培养基上筛选含有重组载体的大肠杆菌。含有重组载体大肠杆菌能在含氨苄青霉素的培养基上生长,但不能在含四环素的培养基上生长,故经过两种培养基培养后再从D处选出所需大肠杆菌。为使人乳铁蛋白基因在牛的乳腺细胞中特异性表达,应在基因的上游插入牛乳腺蛋白基因的启动子等调控组件。 (3)为使供受体处于相同的生理状态,过程②的代孕牛需要进行同期发情处理。对囊胚进行分割时需要注意将内细胞团均等分割。 (4)检测目的基因是否翻译成蛋白质可采用抗原-抗体杂交技术。
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考点分析:
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氮元素是农作物生长必不可少的一种元素能提高农作物产量。如何提高土壤中的氮肥含量成为现代农业研究的热点之一。

1)尿素是农业生产中主要的氮肥,尿素___________________(能或不能)被农作物直接吸收利用。

2)在分离土壤中分解尿素的细菌实验中常用到选择培养基,该选择培养基的选择原理为___________________

3)称取5g土壤,加入95mL无菌水,搅匀;从中取出lmL菌液加入9mL无菌水,摇匀;再重复上述步骤3次,取最后稀释得到的菌液01 mL稀释涂布平板,得平均菌落数为48,则每克土壤样品中的细菌数量为______________________________________

4)自生固氮菌的利用也是提高土壤肥力的方法,自生固氮菌是指在土壤中能够独立进行固氮的细菌,将氮气转变为氨。筛选自生固氮菌的培养基配方如下:甘露醇10gKH2PO4 02gMgSO4·7H2O 02gNaCl 02gCaSO4·2H2O 01gCaCO3 5g、琼脂20g、水1000ml。筛选的自生固氮菌同化作用类型为______________,氮源为_____________

5)自生固氮菌能够固氮是因为其可以产生固氮酶,研究人员想获得自主固氮的农作物,可通过___________________育种方法培育,该育种方法的突出优点为___________________

6)对于需要长期保存的菌种,可以采用___________________的方法保存。

 

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小麦的粒色受独立遗传的两对基因(AaBb)控制现有两个红粒亲本杂交结果如下:

1)亲本的基因型组合是___________________

2)研究表明:细胞中显性基因数量越多(AB效应相同),红色越深。F2红色按深浅依次有深红、红色、中红和淡红四种。F2中淡红小麦自交后代的表现型及比例为___________________

3)小麦抗病(R)对感病(r)为显性,R/rA/aB/b的位置关系如何?某同学认为有两种可能:第一种是三对基因在三对同源染色体上,第二种是三对基因在两对同源染色体上。该同学设计了实验方案解决了这个问题。请用已知品种(甲AABBRR、乙AABBrr、丙AAbbRR、丁aaBBRR、戊aabbrr)完善实验方案和实验结果。

实验方案:

选取___________________作为亲本杂交得到F1F1自交得到F2,统计F2表现型及比例。

实验结果与结论:

①若F2___________________,则三对基因在三对同源染色体上;

②若F2___________________,则三对基因在两对同源染色体上。

(不考虑交叉互换,不区分小麦粒色中红色的深浅程度,要写明表现型和具体比例)

 

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某果园生态系统中,苹果树下进行了间种草菇的试验,获得了良好的经济效益。

1)区别该群落与其它普通果园群落的重要特征是____________

2)苹果树的落叶可为草菇提供营养,栽培草菇剩下的基质又可被果树根系吸收利用,这种生产模式体现了生态系统物质循环的功能。生态系统的物质循环是指____________

3)如果不种草菇也不对果园土壤进行管理,果树林下将会出现从一年生草本植物为优势、到多年生草本植物为优势、再到草本和灌木混生等阶段的演替。在草本和灌木混生阶段,果园内很少有一年生草本植物生长,其原因是________________________

4)光是果园生态系统的重要组分,请结合生态系统的功能概括光在生态系统中所起的主要作用。_______________________________。(写出两点即可)

 

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完成以下与2019新型冠状病毒(2019-nCoV)相关的问题:

12019-nCV在特定受体的介导下进入人体细胞后能以自身RNA为模板,在______________酶作用下合成RNA

22020316日陈薇院士领衔开发的重组新冠疫苗获批启动临床试验。正常情况下,志愿者接种了新冠疫苗后,机体免疫系统能产生的相应抗体,还能产生的免疫细胞有记忆细胞和_____________细胞(填“吞噬”或“T”或“效应T”)。记忆细胞在机体被新冠病毒感染时能够_____________,从而引起预防作用。

3)临床观察到,2019-nCoV肺炎重症患者出现了IL-6等促炎性细胞因子的显著升高,细胞因子风暴是引起急性呼吸窘迫综合征和多脏器损伤衰竭的重要原因。钟南山院士团队通过体外实验证实了中成药莲花清瘟(LH)对新冠病毒复制有显著的抑制效果。为验证“一定浓度的LH对未感染新冠病毒的细胞表达细胞因子无影响,对感染新冠病毒的细胞过量表达细胞因子有显著抑制作用”,请运用下列材料用具完成实验方案并预测实验结果。

材料用具:Huh-7细胞、改良Eagle培养基、SARS-CoV-2病毒、一定浓度的LH溶液、细胞因子表达水平的检测方法等。

方案步骤:①将Huh-7细胞培养后随机均分为_____________组,依次编号为A、……;

A组不处理(不接种病毒+不加入LH),_____________

③各组细胞经相同时间培养后,通过一定方法检测细胞因子表达水平(各组值分别记为YA……)。

预期的实验结果:____________________________________________________________

4LH被国家推荐用于2019-nCoV肺炎的治疗,效果较为显著。试分析LH治疗2019-nCoV肺炎的可能机理。____________________________________。(写出2点即可)

 

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据研究,光合作用和有氧呼吸第三阶段ATP的形成均与膜上ATP合成酶的特点密切有关:该酶既有运输作用,又有催化作用,能利用质子(H+)浓度差的推动形成ATP

 

1ATP合成酶由头部F1和尾部F0组成,请推测F0具有____________(填亲水性疏水性)。

2)黑暗条件下,小球藻中该酶位于__________膜上。照光条件下,光反应产物有ATPO2NADPH NADPH的中文名称是__________

3)有氧呼吸第三阶段的化学反应式为:____________________。该过程是一系列化学反应,最后催化H2O形成的是氧化酶,它有多样性。交替氧化酶(AOX)就是其中一种,其氧化过程没有质子过膜运动,使得细胞呼吸过程中释放的热量比一般情况__________,这对某些植物有一定的适应意义。

4)有研究表明,常温下强光可以诱导植物叶片AOX活性上调,从而有效减轻强光对光合作用的抑制。请绘制出光照强度对净光合速率影响的曲线图。

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