Question

已知某RNA病毒包膜表面的S蛋白负责病毒的吸附、融合和侵入宿主细胞，也是诱导宿主体液免疫反应的抗原。针对该病毒的S蛋白研制疫苗和抗体的部分流程如下图。回答下列问题：

（1）过程①提取该抗原的RNA并将RNA____形成DNA。要获得大量的病毒基因可利用PCR技术扩增，其前提是要有一段已知S蛋白基因的脱氧核苷酸序列，以便____。

（2）过程③中，常利用改造后的腺病毒来充当载体携带S蛋白基因，则改造后的腺病毒能作为载体需具备的条件有____（答出两点即可），拼装S蛋白基因重组载体所需的工具酶有____。

（3）提取的S蛋白可作为疫苗使用，选择以病毒包膜的S蛋白作为疫苗比开发减毒病毒作为疫苗更安全，主要原因是____。

（4）通过过程⑦获得的X称为____，其产物的主要优点有____（答出两点即可）。

Answer

逆转录 合成引物 能自主复制、有多个限制酶切位点、有标记基因、对宿主细胞无害 限制酶和DNA连接酶 蛋白质不具侵染性，不会破坏细胞结构 杂交瘤细胞 特异性强、灵敏度高、可大量制备

【解析】

分析题图可知，图示为利用转基因技术和动物细胞融合技术制备抗S蛋白单克隆抗体流程，利用病毒RNA经过①过程逆转录得到病毒DNA，通过②PCR技术扩增获得大量S蛋白基因，③过程为基因表达载体的构建，④过程为将目的基因导入受体细胞，⑤过程为S蛋白作为抗原刺激小鼠B细胞，⑥过程为B细胞增殖分化生成浆细胞，⑦过程为利用诱导剂诱导浆细胞与小鼠骨髓瘤细胞进行融合并筛选，获得产生抗S蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞，再经过⑧大规模培养得到抗S蛋白单克隆抗体。

（1）以RNA为模板合成DNA的过程称为逆转录；利用PCR技术扩增目的基因时，需要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成引物，引物在PCR扩增过程可引导子链的延伸。

（2）为携带外源DNA进入受体细胞并能稳定存在和表达，作为载体需具备的条件有：能自主复制、有多个限制酶切位点、有标记基因、对宿主细胞无害。构建S蛋白基因重组载体的过程需要用相同的限制酶切割目的基因和载体，然后用DNA连接酶将二者连接起来。

（3）减毒的病毒可能会恢复活性，可能会对人体细胞造成一定的伤害，从而引起一系列并发症，而S蛋白与减毒病毒相比，不具侵染性，不会破坏细胞结构，因此用S蛋白作为疫苗更安全。

（4）由分析可知，⑦过程获得的X为杂交瘤细胞，能产生抗S蛋白单克隆抗体，单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高、可大量制备的优点。