Question

生长激素是重要医药产品。科研人员利用基因工程构建乳房生物反应器，利用基因工程构建乳房生物反应器，首先要将生长激素基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，通过乳汁大量生产生长激素。请回答下列问题：

（1）在构建基因表达载体过程中，使用两种酶切割含目的基因的DNA片段和载体的优点是：________

A．防止目的基因和载体的任意连接        B．保证目的基因和载体的定向连接

C．防止目的基因自身连接            D．形成不同的黏性末端

（2）若选择胚胎干细胞作为受体细胞，采用核移植技术获得生物反应器比较容易，原因是胚胎干细胞分化程度______________，恢复其全能性相对容易。

（3）若选择胚胎干细胞作为受体细胞，通常用__________法将基因表达载体导入。从囊胚的__________中分离，可获取胚胎干细胞。

（4）若将幼体的组织离体进行细胞培养，经原代培养后分瓶继续培养，只有少数细胞存活下来，其遗传物质__________（发生/未发生）改变。

Answer

ABCD 低 显微注射 内细胞团 发生

【解析】

基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术.个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

（1）在构建基因表达载体过程中，使用两种酶切割含目的基因的DNA片段和载体可以使其两端形成不同的黏性末端，从而保证目的基因和载体的定向连接，防止目的基因和载体的任意连接和自身环化，ABCD正确。

故选ABCD。

（2）胚胎干细胞分化程度低，全能性高，恢复其全能性相对容易，选择胚胎干细胞作为受体细胞，核移植获得生物反应器比较容易成功。

（3）通常用显微注射法将基因表达载体导入动物细胞。胚胎干细胞可以来源于囊胚的内细胞团。

（4）绝大多数动物细胞分裂50代左右就不能再分裂下去，只有少数细胞因为遗传物质发生改变，导致细胞癌变，可以无限增殖下去。