Question

阿拉伯胶是一种多糖，也称阿拉伯树胶，是一种产于非洲撒哈拉沙漠以南的半沙漠带的天然植物胶，主要包括有树胶醛糖、半乳糖、葡萄糖醛酸等。在食品、医药、化妆品及其他工业上有广泛的应用。其水溶液易被细菌、真菌或酶降解。为研究自然界中微生物对阿拉伯胶的降解作用，研究者从某地合欢树下距离地表深10～15cm处的土样中初筛到能合成阿拉伯胶降解酶的“M”菌。

请回答下列问题：

（1）某同学将初筛菌液接种在固体培养基上，其中一个平板经培养后的菌落分布如下图所示。该同学采用的接种方法是___________；从结果推测该同学接种时可能出现的失误是：_____________________。

（2）观察发现：“M菌的菌落为粉白色，菌落初期呈突起絮状。在显微镜下观察到：菌丝白色致密，且有分生孢子，细胞核直径约1μm。可断定“M”菌为___________（填“细菌”或“真菌”），判断依据是：______________________。

（3）分离该阿拉伯胶降解酶可用电泳法，其原理是根据蛋白质分子的___________以及分子本身的大小、形状的不同，使之在电场中的___________不同而实现分离。

（4）下表中培养液pH均为6．0，若对“M”中阿拉伯胶降解酶的活力进行测定，则应选用表中的______培养液，不选用的其他培养液的原因分别是：______________________。

实验用培养液配方
培养 液	阿拉 伯胶	阿拉伯  胶酶	NaNO3	牛肉膏	K2HPO4	MgSO4·7H2O	KC1	FeSO4·7H2O
A	25g/L	一	—	—	lg/L	lg/L	0．5g/L	0．01g/L
B	25g/L	1μg/L	一	3g/L	1g/L	1g/L	0．5g/L	0．01g/L
C	一	—	3 g/L	—	1g/L	lg/L	0．5g/L	0．01g/L
D	25g/L	—	3 g/L	一	1g/L	1g/L	0．5g/L	0．01g/L

Answer

稀释涂布平板法 未涂布均匀 真菌 “M”菌具有细胞核 带电性 迁移速度 D A培养液缺少氮源，“M”无法生长；B培养液有阿拉伯胶酶，会影响对“M”自身产生的酶活力的测定结果；C培养液无碳源，会影响“M”的生长，缺乏底物阿拉伯胶，也无法对阿拉伯胶酶活力进行测定

【解析】

选择培养基的原理是：不同微生物在代谢过程中所需要的营养物质和环境不同。有的适于酸性环境，有的适于碱性环境；例如从土壤中分离放线菌时，可在培养基中加入10%的酚数滴，抑制细菌和真菌的生长；如培养酵母菌和霉菌，可在培养基中加入青霉素；培养金黄色葡萄球菌，可在培养基中加入高浓度的食盐。

（1）据平板培养结果显示，培养后形成了单个的菌落可知该同学采用的接种方法是稀释涂布平板法，图中菌落分布不均匀，可能原因是涂布不均匀导致的。

（2）在显微镜下观察发现M菌株菌丝白色致密，细胞核直径约lμm，初步推测菌株M属于真菌。因为真菌属于真核生物，具有细胞核，细菌属于原核生物，没有细胞核。

（3）电泳法分离蛋白质的原理是根据蛋白质分子的带电性质和电量、大小及形状不同，在电场中受到的作用力大小、方向、阻力的不同，在电场中的迁移速度不同而实现分离。

（4）对菌株M中阿拉伯胶降解酶的活力进行测定，则必须以阿拉伯胶为唯一碳源，同时需要加入氮源，据表显示最好选择D培养液。A培养液缺少氮源，“M”无法生长；B培养液有阿拉伯胶酶，会影响对“M”自身产生的酶活力的测定结果；C培养液无碳源，会影响“M”的生长，缺乏底物阿拉伯胶，也无法对阿拉伯胶酶活力进行测定。