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乙型肝炎病毒(HBV)可引发慢性肝炎、肝硬化等疾病,乙型肝炎病毒调节蛋白HBx对...

乙型肝炎病毒(HBV)可引发慢性肝炎、肝硬化等疾病,乙型肝炎病毒调节蛋白HBx对HBV复制有重要作用。图1表示在PCR过程中HBx基因与引物的关系,图2表示利用中国仓鼠生产乙肝病毒HBx蛋白流程图。回答下列问题:

(1)利用PCR技术扩增图1中HBx基因时,在第______次循环结束后即可出现两条链等长的目的基因片段。图2中②过程需要用到限制酶和DNA连接酶,两种酶作用的化学键______(填“相同”或“不相同”)。

(2)基因表达载体导入受精卵常用______法,检测HBx基因是否转录出mRNA时,需要用______做探针,再与相应的物质杂交。

(3)④过程体外受精前需要对精子进行______处理,卵母细胞需要发育到______期,才具备与精子受精的能力。⑤过程将获得的早期胚胎移植到经过______处理的受体仓鼠子宫内。

(4)在⑤步聚操作前对胚胎进行了检查和筛选,发现有些胚胎因为外源基因的插入而死亡外源基因插入导致胚胎死亡的原因可能是______

 

3 相同 显微注射 放射性同位素标记的含目的基因的DNA片段 获能 MⅡ中 同期发情 外源基因的插入导致胚胎正常发育所需的基因不能表达 【解析】 基因工程的操作步骤:目的基因的获取、构建基因表达载体、把目的基因导入受体细胞、目的基因的检测和鉴定。 图2中:①获取目的基因、②构建基因表达载体、④体外受精、⑤胚胎移植。 (1)利用PCR技术扩增的过程为,由此可知,图1中HBx基因时,在第3次循环结束后即可出现两条链等长的目的基因片段。图2中②过程需要用到限制酶和DNA连接酶,两种酶作用的化学键相同,都是磷酸二酯键。 (2)将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;检测HBx基因是否转录出mRNA时,应该采用分子杂交技术,需要用放射性同位素标记的含目的基因的DNA片段做探针,再与RNA进行杂交,看是否出现杂交带。 (3)④为体外受精,该过程前需要对精子进行获能处理,卵母细胞需要发育到MⅡ中期,才具备与精子受精的能力。⑤过程将获得的早期胚胎移植到经过同期发情处理的受体仓鼠子宫内,以保证胚胎移植入相同的生理环境。 (4)胚胎移植前对胚胎进行了检查和筛选,发现有些胚胎因为外源基因的插入而死亡,可能原因是:外源基因的插入导致胚胎发育所需的正常基因不能表达。
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考点分析:
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哺乳动物产生的凝乳酶是一种重要的商用酶。图1是利用生物工程技术快速生产凝乳酶的过程;图2是图1中过程⑤合成的含有目的基因的DNA[片段,HindⅢ、EcoRIBamHI分别为三种限制性内切酶,下图2中箭头所指为三种限制酶的切点;图3表示某种大肠杆菌的质粒中含有β半乳糖苷酶α片段序列,大肠杆菌的DNA分子中则含有β半乳糖酶ω片段序列,由于天然大肠杆菌同时具备这两种片段序列,可以使培养基中含有Xgal底物转变成蓝色产物,当缺少任意一个α或ω片段序列,Xgal底物不能转变成蓝色产物。图4是大肠杆菌中的质粒放大图。

1)图1中所示通过①②③过程获取目的基因的方法为______________________

2)能否在该哺乳动物的唾液腺细胞中获得相关的mRNA,为什么?______________

3)将经转基因技术处理过的质粒导入大肠杆菌后,再将大肠杆菌接种到含有Xgal底物的培养基培养一段时间后,培养基中出现较多的蓝色菌落,这是因为__________________

4)应选用的限制性内切酶是____________,选择的依据是____________

5)图中的引物是RNA分子片段,由过程②设计该引物的原理依据是________

6)过程⑩的基本环节如下图:

酶蛋白沉淀的方法有_____________,提纯酶的方法常用_____________

 

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果蝇的卷曲翅(A)对正常翅(a)为显性,现有表中四种果蝇若干只,可选作亲本进行杂交实验.

序号

表现型

卷曲翅♂

卷曲翅♀

正常翅♂

正常翅♀

 

(1)若表中四种果蝇均为纯合子(XAY、XaY视为纯合子),要通过一次杂交实验确定基因A、a是在常染色体上还是在X染色体上,可设计如下实验:

选用______(填序号)为亲本进行杂交,如果子代表现型为______,则基因位于X染色体上.

(2)若不确定表中四种果蝇是否为纯合子,但已确定A、a基因在常染色体上,为进一步探究该基因是否存在显性纯合致死现象(胚胎致死),可设计如下实验:选取甲和乙做亲本杂交,如果子代表现型及比例为______,则存在显性纯合致死,否则不存在.

(3)若已确定A、a基因在常染色体上且存在显性纯合致死现象,选用卷曲翅果蝇中的白眼(XbXb)与红眼(XBY)杂交,F1中,卷曲翅白眼果蝇的基因型是______,正常翅红眼果蝇占F1的比例为______

 

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根据图示回答下列问题:

(1)此图表示了细胞与周围环境的关系,其中毛细血管管壁细胞生活的具体内环境是____________(填标号)。

(2)物质进出细胞的方式有多种。以氧气为例,氧从血液进入组织细胞的方式是____________;红细胞所携带的氧气至少需要经过____________层膜才能被组织细胞①利用。

(3)血浆、组织液和淋巴三者之间既有密切关系,又有一定区别。一般情况下,②与③成分上的主要区别是_______________________________

(4)正常人②内的pH通常维持在____________之间,直接起调节作用的是血液中的___________物质。

(5)若某人长期营养不良,血浆中蛋白质降低,图中哪一部分的液体会增多[  ]___________,其结果将会引起组织水肿。

(6)肺气肿病人由于呼吸不畅,会使内环境中的pH____________,内环境稳态的本质为____________

 

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某池塘中生长的浮游植物、浮游动物、水草,草鱼,乌鱼(肉食性鱼类)等水生动植物。请回答:

(1)该池塘中,各个生物种群占据了不同的空间,体现了群落的_____________结构。

(2)当少量生活污水进入该池塘后,其生物种类数量,不会受到明显影响,这是因为该池塘生态系统,具有一定的自我调节能力。生态系统的稳定性是指_____________

(3)已知小球藻直径约为三至八微米。若要调查池塘中小球藻的种群密度,可采用____________的方法,具体做法是先将盖玻片放在_____________(填仪器名称)的计数室上,用吸管吸取水样滴于盖玻片边缘,让其自行渗入,稍待片刻后,在显微镜下计数、估算。

(4)经调查,草鱼的粪便中含有能量为100焦耳,呼吸消耗的能量为240焦耳,用于生长发育和繁殖的能量为120焦耳,则草鱼的同化量为_____________焦耳。该同化量还存在的能量去路有_____________该池塘对社区的小气候有一定的改善作用,这体现了生物多样性的_____________价值。若该池塘被废弃后,逐渐干涸并长出杂草,若干年后会逐渐形成小树林,这种变化属于_____________演替。

 

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紫色洋葱的叶分为两种:管状叶伸展于空中,进行光合作用;鳞片叶层层包裹形成鳞茎,富含营养物质。下面以紫色洋葱为材料进行如下实验:

(1)若进行叶绿体色素的提取与分离实验,所用的实验材料应为洋葱的_____________。各种色素能在滤纸条上分离的原理是它们_____________

(2)观察植物细胞的质壁分离和复原所用的具体材料是洋葱的_____________,该实验采用的对照处理称为________________________

(3)观察有丝分裂时,将洋葱老根去除,水培生根后剪取根尖:

①将根尖浸在盐酸-酒精配成的溶液中3~5min,作用是____________________________________

②清水漂洗后,可用石炭酸—品红试剂染色,根据所学知识推测,这是一种____________性染料。

③为了获得相应的观察视野,镜检时正确的操作方法是________________________

④为了统计数据更加科学,计数时应采取的方法是____________________________________

⑤观察记录时,应统计________________________________________________,并据此计算细胞分裂指数(细胞分裂指数是指细胞群体中分裂细胞所占的百分比)。

 

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