Question

下列有关实验的操作中，错误的是（    ）

①煮沸消毒可以杀死微生物的营养细胞和部分芽孢

②接种操作要在酒精灯火焰附近进行

③植物组织培养过程中，接种的外植体要进行消毒

④家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌

⑤培养基要进行高压蒸气灭菌

⑥加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌

⑦接种环应采用火焰灼烧的方式灭菌

A.①③

B.②④

C.⑤⑦

D.④⑥

Answer

D

【解析】

1．无菌技术的主要内容①对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒；②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。2、消毒是指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物。消毒方法有煮沸消毒、化学药物消毒、紫外线消毒。3、灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。实验室常用的灭菌方法①灼烧灭菌：将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属工具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，此外，在接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰燃烧来灭菌；②干热灭菌：能耐高温的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具等，可以采用这种方法灭菌；③高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内，为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100kPa，温度为121℃的条件下，维持15～30min。

①100℃煮沸5～6min可以杀死微生物细胞和一部分芽孢，①正确；

②酒精灯火焰附近存在一个无菌区，无菌操作时，接种操作要在酒精灯火焰附近进行，②正确；

③在组织培养过程中，无菌操作是成功的关键，因此用于培养的外植体要先做消毒处理，③正确；

④利用葡萄制作葡萄酒利用的是附着于葡萄皮表面的野生型酵母菌，所以制作葡萄酒时葡萄不进行灭菌，以免杀死酵母菌，④错误；

⑤培养基的灭菌方法是高压蒸汽灭菌，⑤正确；

⑥指示剂和染料可能混有微生物，故加入培养基前需灭菌，⑥错误；

⑦接种环应采用灼烧灭菌的方法，⑦正确。

综上错误的选项是④⑥，故选D。