Question

利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似（如下图所示）。图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。下列叙述错误的是（    ）

A.第四轮循环产物中PCR方法扩增出的目的基因片段只有8个

B.设计引物时需要避免引物之间形成碱基互补配对而造成引物自连

C.退火温度过高可能导致PCR反应得不到任何扩增产物

D.第四轮循环产物中同时含有引物A和引物B的DNA片段所占的比率为15/16

Answer

D

【解析】

PCR全称为多聚酶链式反应，是一种体外迅速扩增DNA片段的技术，它能以极少量的DNA为模板，在几个小时内复制出上百万份的DNA拷贝。PCR的原理为DNA复制，需要在一定的缓冲液中进行，所需的条件为模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）。PCR的反应过程：变性、复性、延伸。PCR产物以指数的方式扩增，即一个DNA分子经n次扩增，产物总量为2n。

A、根据DNA半保留复制的特点，经过第一、二轮循环产生的DNA分子两条链长度均不相等，第三轮循环后产生的DNA中有2个为两条链等长的目的基因片段，则第四轮循环产物中有8个两条链等长的目的基因片段，A正确；

B、设计引物时，需要避免引物之间形成碱基互补配对而造成引物自连，影响引物与目的基因单链的结合，B正确；

C、退火的目的是使两种引物通过碱基互补配对与两条DNA单链结合，而高温条件下DNA双链会分开，因此退火温度过高可能引起两种引物不能与两条DNA单链结合，进而导致PCR反应得不到任何扩增产物，C正确；

D、DNA复制为半保留复制，第四轮循环即DNA复制4次，共形成24＝16个DNA分子，其中含有最初模板链的2个DNA分子含有引物A或引物B，其余14个DNA分子均含有引物A和引物B，所以第四轮循环产物中同时含有引物A和引物B的DNA片段所占的比率为14/16＝7/8，D错误。

故选D。