Question

OKT3为第一个用于临床的抗T细胞的单克隆抗体。该抗体是针对T细胞上的CD3（一种抗原）的，可以减小同种异体排斥反应，具有中等强度的免疫抑制效应，有利于器官移植。请回答下列问题：

（1）OKT3的制备过程中利用的动物细胞工程技术有___________________。

（2）制备OKT3时，首先要将__________注入小鼠体内，从小鼠的_________中获得相应的B淋巴细胞，需要将该种细胞与_____________融合并经过选择性培养基筛选，获得的细胞还需进行克隆化培养和_________，才能得到专一产生OKT3的杂交瘤细胞。

（3）研究人员发现，注入小鼠体内的OKT3能作用于T细胞，T细胞的功能受到影响时会导致小鼠体内的抗体合成量明显下降，请解释其原因是___________________________。

Answer

动物细胞培养、动物细胞融合技术 OKT3抗原 脾脏 骨髓瘤细胞 抗体检测 当T细胞受损时，T细胞无法正常分泌淋巴因子，淋巴因子分泌量减少，会导致B细胞不能正常分化形成浆细胞，最终导致抗体的生产量减少

【解析】

单克隆抗体的制备
（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞
（2）获得杂交瘤细胞
①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合；
②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。
（3）克隆化培养和抗体检测；
（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖；
（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。

（1）OKT3单克隆抗体的制备过程中依据了动物细胞增殖和细胞膜的流动性的原理，应用的动物细胞工程技术有动物细胞培养、动物细胞融合技术。
（2）制备OKT3时，首先要将OKT3抗原注入小鼠体内；以获得相应的经过免疫的B淋巴细胞即浆细胞，浆细胞可以从小鼠的免疫器官脾脏中获得；需要将该细胞和骨髓瘤细胞融合、杂交后要经过两次筛选，最终获得既能产生针对CD3的抗体，又能无限增殖的杂交瘤细胞。获得的细胞还需进行克隆化培养和专一抗体阳性检测，才能得到专一产生OKT3的杂交瘤细胞。

（3）B淋巴细胞的增殖分化需要淋巴因子的刺激，据题干信息可知，OKT3能作用于T细胞，当T细胞受损时，T细胞无法正常分泌淋巴因子，淋巴因子分泌量减少，会导致B细胞不能正常分化形成浆细胞，最终导致抗体的生产量减少。