Question

果胶酶在工业上可用于果汁、果酒的澄清提取、果实脱皮，某实验小组通过富集培养结合刚果红染色法，初步筛选出具有果胶分解能力的菌株，回答下列问题。

（1）分离果胶分解菌，可以从含腐殖质丰富的桔子园土壤中取样，原因是____________________。

（2）实验室对培养基灭菌的一般方法为___________________，筛选果胶分解菌需要将稀释后的土壤溶液接种到以_________为唯一碳源的液体培养基上，培养基中还需要加入K₂HPO₄和KH₂PO₄，其作用是_______。

（3）在含有果胶的培养基上加入刚果红，果胶和刚果红能形成红色复合物，用该培养基培养果胶分解菌时会出现以该菌的菌落为中心的_________，形成原因是_________。

（4）实际生产中若要对筛选的果胶分解菌进行重复利用，可用_________法固定化果胶分解菌，固定化果胶酶时不宜采用该方法的原因是___________________________。

Answer

桔子园的腐殖质中含有较多果胶，土壤中果胶分解菌含量丰富 高压蒸汽灭菌法 果胶 提供无机盐并维持培养液的pH 透明圈 果胶分解菌能产生果胶酶，分解果胶后红色复合物消失，形成透明圈 包埋 酶颗粒小，容易从包埋材料中漏出

【解析】

果胶酶能分解果胶等物质，澄清果蔬饮料，在食品加工业中有着广泛的应用。果胶酶是一类酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶等。其本质都是蛋白质，可以用蛋白质的凝胶电泳进行分离提纯。

（1）由于桔子园的腐殖质中含有较多果胶，土壤中果胶分解菌含量丰富，所以分离果胶分解菌，可以从含腐殖质丰富的桔子园土壤中取样。

（2）实验室对培养基灭菌的一般方法为高压蒸汽灭菌法，筛选果胶分解菌需要将稀释后的土壤溶液接种到以果胶为唯一碳源的培养基中培养，这样只有以果胶为碳源的微生物能够存在，培养基中还需要加入K2HPO4和KH2PO4，可以提供无机盐并维持培养液的pH。

（3）含有果胶的培养基上加入刚果红，果胶和刚果红能形成红色复合物，但是果胶分解菌能够分解果胶，从而导致红色复合物消失，形成透明圈。

（4）固定化细胞一般采用的方法是包埋法，固定化酶一般不采用包埋法，原因是酶颗粒小，容易从包埋材料中漏出。