Question

在许多生物实验中，为保证实验成功，需要对实验设备、用品及材料进行灭菌或消毒。下表所列实验、处理对象与处理方法的对应关系中，错误的是（    ）

选项	实验	处理对象	处理方法
A	植物组织培养	外植体	用70%的酒精和氯化汞（或次氯酸钠）消毒
B	土壤中分解尿素的细菌的分离与计数	涂布器	先用70%的酒精浸泡，再用酒精灯火焰灼烧
C	多聚酶链式反应扩增DNA片段	微量离心管、一次性吸液枪头	用70%的酒精消毒
D	分解纤维素的微生物的分离	选择培养基、鉴别培养基	高压蒸汽灭菌

A.A B.B C.C D.D

Answer

C

【解析】

1、植物组织培养中，各种大小的培养皿、试管、三角瓶、取样器的头（或称“枪头”、“tip”）、移液管、三角刮刀、接种环、镊子、培养基等通常采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。接种室、接种箱或超净工作台在使用前，可以用紫外线照射30min，以杀死物体表面或空气中的微生物。若使用自然生长的茎进行组织培养，则可取一段茎在70%的酒精中浸泡10min，再放入5%次氯酸钠溶液中浸泡5 min，然后用另一5%次氯酸钠溶液中浸泡5 min，最后在超净工作台中用无菌水清洗，将茎的切段培养在生芽培养基中。

2、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数采用稀释涂布平板法，分离时需要使用涂布器进行涂布，涂布器使用时，将涂布器末浸在体积分数为70%的酒精的烧杯中，取出时，要让多余的酒精在烧杯中滴尽，然后将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃进行灭菌处理。

3、在多聚酶链式反应扩增DNA片段的实验中，为避免外源DNA等因素的污染，PCR实验中使用的微量离心管、枪头、缓冲液以及蒸馏水等在使用前必须进行高压蒸汽灭菌处理。

4、从土壤中分解纤维素的微生物的分离，利用以纤维素为唯一碳源的选择培养基进行筛选，筛选后利用鉴定培养基，刚果红染色法进行鉴定，在微生物培养和选择过程中所需的培养基都必须进行高压蒸汽灭菌处理。

A.根据以上分析可知，在植物组织培养中，外植体在70%的酒精中浸泡10min，再放入5%次氯酸钠溶液中浸泡5 min，然后用另一5%次氯酸钠溶液中浸泡5 min，最后在超净工作台中用无菌水清洗，A正确；

B. 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数采用稀释涂布平板法，分离时需要使用涂布器进行涂布，涂布器使用时，先用70%的酒精浸泡，再用酒精灯火焰灼烧，B正确；

C. 在多聚酶链式反应扩增DNA片段的实验中，使用的微量离心管、一次性吸液枪头、缓冲液以及蒸馏水等在使用前必须进行高压蒸汽灭菌处理，C错误；

D. 从土壤中分解纤维素的微生物的分离，利用以纤维素为唯一碳源的选择培养基进行筛选，然后在利用刚果红鉴定培养基进行鉴定，培养基采用高压蒸汽灭菌法，D正确。

故选C。