Question

绞股蓝细胞中含有抗烟草花叶病毒（TMV）基因，可以合成一种抗TMV蛋白，叶片对TMV具有抗感染性。烟草是重要的经济作物，由于TMV的感染会导致大幅度减产。研究人员利用转基因技术培育出了抗TMV的烟草，主要流程如图所示，请据图回答下列问题：

（1）科学家首先从绞股蓝细胞中提取抗TMV基因转录的RNA，然后合成目的基因。图中过程①表示________，获得的DNA必须在两侧添加________和终止子，还要添加________酶能识别切割的碱基序列。

（2）由图分析，在过程③构建的重组Ti质粒上应该含有的标记基因是________基因，重组Ti质粒导入烟草体细胞的方法是________。

（3）在过程⑤培养基中需要添加卡那霉素、植物必需的各种营养成分和植物激素，以保证 受体细胞能培养成再生植株。其中过程⑤添加卡那霉素的作用是_____________。

（4）在个体水平的鉴定过程中，可通过________的方法来确定植株是否具有抗性。

Answer

反转录 启动子 限制性核酸内切 卡那霉素抗性 农杆菌转化法 鉴定和选择目的基因导入成功的受体细胞 接种烟草花叶病毒

【解析】

由图可知，①是逆转录过程，③是构建基因表达载体，④是将目的基因导入受体细胞．⑤是目的基因的检测与鉴定，⑥是植物组织培养过程。

（1）①是以RNA为模板合成DNA分子的过程，是反转录过程；必须在获得目的基因两侧添加启动子、终止子，同时需要添加限制性核酸内切酶能识别切割的碱基序列。

（2）重组Ti质粒上应该含有抗卡那霉素基因是标记基因；可以用农杆菌转化法重组Ti质粒导入烟草体细胞。

（3）⑤是目的基因的检测与鉴定，所以添加卡拉霉素的作用是鉴定和选择目的基因导入成功的受体细胞。

（4）实验的目的是培育出抗TMV的烟草，所以可以通过接种烟草花叶病毒来确定植株是否具有抗性。