下列有关生物学实验操作、材料、条件等方面的叙述,正确的是( )
A.“设计并制作生态缸,观察其稳定性”实验中,生态缸应放在直射光照下,以保证有足够的能量来源
B.“土壤中小动物类群丰富度的调查”实验中,利用了土壤小动物趋光、趋热的特点
C.“用样方法调查某地某植物种群密度”实验中,求出所有样方该植物的总数,除以所有样方的面积之和,可为该地该植物的种群密度
D.“探究酵母菌种群数量动态变化”实验中,将稀释的样品滴在计数板上,再轻轻盖上盖玻片,然后在显微镜下计数。
下图为某种质粒表达载体简图,小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点,ampR为青霉素抗性基因,tetR为四环素抗性基因,P为启动子,T为终止子,ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRI、BamHI在内的多种酶的酶切位点。
据图回答:
(1)将含有目的基因的DNA与质粒表达载体分别用EcoRI 酶切,酶切产物用DNA连接酶进行连接后,其中由两个DNA片段之间连接形成的产物有_______________、_____________、__________三种。若 要从这些连接产物中分离出重组质粒,需要对这些连接产物进行____________。
(2)用上述3种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞进行转化实验。之后将这些宿主细胞接种到含四环素的培养基中,能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是_________;若接种到含青霉素的培养基中,能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是_________。
(3)目的基因表达时,RNA聚合酶识别和结合的位点是_________,其合成的产物是_________。
(4)在上述实验中,为了防止目的基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接,酶切时应选用的酶是_______。
回答利用农杆菌转化法培育转基因植物的相关问题:
(1)培育转基因植物过程的核心步骤是构建基因表达载体,其目的是使目的基因在受体细胞中_____,并且可以通过复制遗传给下一代,同时,使目的基因表达和发挥作用.
(2)构建基因表达载体时,可利用DNA连接酶连接被限制酶切开的_____键.
(3)组成基因表达载体的单体是_____.基因表达载体中的启动子是_____识别和结合的部位,这种结合完成后才能驱动目的基因通过_____(填过程)合成mRNA.
(4)用两种限制酶XbaI和SacI(两种酶切出的黏性末端不同)切割某DNA,获得含目的基因的片段.若利用该片段构建基因表达载体,应选用下图中的何种Ti质粒?_____
(5)将受体细胞培养成植株需要应用_____技术,该技术的理论依据是_____.
下图表示从苏云金芽孢杆菌分离出来的杀虫晶体蛋白质基因(简称Bt基因)及形成转基因抗虫棉的图解。请回答:
(1)图中a过程要用到的酶是 。
(2)在进行图中b过程时.由我国科学家独创的十分简便经济的方法是 ,此 外,也经常采用 法。若要培育转基因绵羊,则此过程要用 的方法。
(3)为确定抗虫棉是否培育成功,既要用放射性同位索标记的 作探针进行分子杂交测试,又要在个体水平上鉴定,后者具体过程是 。
(4)活化的毒性物质应是一种 分子,可以全部或部分嵌合于昆虫的细胞 膜上,使细胞膜产生孔道,导致细胞由于渗透平衡的破坏而破裂。
(5)我国在“863”计划资助下开展Bt抗虫棉、抗虫水稻等研究,可以减少农药、杀虫剂的使用。这将对 起到重要作用。
绞股蓝细胞中含有抗烟草花叶病毒(TMV)基因,可以合成一种抗TMV蛋白,叶片对TMV具有抗感染性。烟草是重要的经济作物,由于TMV的感染会导致大幅度减产。研究人员利用转基因技术培育出了抗TMV的烟草,主要流程如图所示,请据图回答下列问题:
(1)科学家首先从绞股蓝细胞中提取抗TMV基因转录的RNA,然后合成目的基因。图中过程①表示________,获得的DNA必须在两侧添加________和终止子,还要添加________酶能识别切割的碱基序列。
(2)由图分析,在过程③构建的重组Ti质粒上应该含有的标记基因是________基因,重组Ti质粒导入烟草体细胞的方法是________。
(3)在过程⑤培养基中需要添加卡那霉素、植物必需的各种营养成分和植物激素,以保证 受体细胞能培养成再生植株。其中过程⑤添加卡那霉素的作用是_____________。
(4)在个体水平的鉴定过程中,可通过________的方法来确定植株是否具有抗性。
盐害是导致全球水稻减产的重要原因之一,中国水稻研究所等单位的专家通过农杆菌转化法将CMO基因、BADH基因、mtld基因、gutD基因和SAMDC基因5个耐盐基因导入水稻,获得了一批耐盐转基因植株。请分析回答下列问题:
(1)水稻耐盐性状由__________个基因控制。
(2)获得耐盐基因后,构建重组DNA分子所用的限制性核酸内切酶作用于左下图中的__________处(填“a”或“b”)。耐盐基因的载体是________________________________。 从个体水平上检测耐盐转基因水稻是否成功可采用什么方法?___________________________________________。