Question

无菌操作是微生物接种技术的关键；传统发酵技术和微生物分离、纯化、应用过程及植物组织培养和动物细胞培养过程中，均要无菌操作。回答下列相关问题：   

（1）消毒和灭菌是两个不同的概念，灭菌是指彻底杀灭微生物使其永远丧失生长繁殖的能力。消毒仅指杀死一部分对人体有害的病原菌而对被消毒的物体基本无害。下列哪些事物适用于消毒处理__________ 。

①皮肤  ②饮用水  ③牛奶 ④注射器 ⑤培养皿  ⑥接种环   ⑦培养基    ⑧果汁   ⑨酱油  ⑩手术刀           

A．①②③⑧⑨       B．④⑤⑥⑦⑩   C．①②③④⑤⑥⑧  D．以上全部

（2）配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行调整_____________， 接种前要进行_____________， 在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在无菌条件下进行。

（3）在微生物的实验室培养中，获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。下图是利用_______法进行大肠杆菌接种，把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。为达到这一目的，操作上应注意：每次划线前要___________；冷却后从上一区划线末端开始划；首尾区_____________。   

（4）有位同学在家制作泡菜时，为避免杂菌污染而向泡菜坛中加入了青霉素，结果发酵失败，原因可能是______________________。

Answer

A pH 高压蒸汽灭菌 平板划线 灼烧接种环 不连接（不重叠） 青霉素杀死了乳酸菌

【解析】

1、常用灭菌方法：灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌法。培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌和消毒方法依次：高压蒸汽灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌、化学消毒、紫外线灭菌、巴氏消毒法。

2、选择培养基的原理是：不同微生物在代谢过程中所需要的营养物质和环境不同。有的适于酸性环境，有的适于碱性环境；例如从土壤中分离放线菌时，可在培养基中加入10%的酚数滴，抑制细菌和真菌的生长；如培养酵母菌和霉菌，可在培养基中加入青霉素；培养金黄色葡萄球菌，可在培养基中加入高浓度的食盐。

（1）根据上述分析可知，①皮肤、②饮用水、③牛奶、⑧果汁、⑨酱油应采用消毒，④注射器、⑤培养皿、⑥接种环、⑦培养基、⑩手术刀应采用灭菌，故选A。

（2）配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行调整pH，培养基接种前要进行高压蒸汽灭菌，再进行倒平板。

（3）由图可知，图示是采用的平板划线法接种，需要注意的是连续划线时，每次划线前要灼烧接种环，同时划线结束首尾不能相连。

（4）制作泡菜时，为避免杂菌污染而向泡菜坛中加入了青霉素结果发酵失败，原因可能是青霉素杀死了乳酸菌。