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生活在土壤中的微生物种类和数量繁多,为从土壤中微生物筛选到能分解尿素的细菌。培养...

生活在土壤中的微生物种类和数量繁多,为从土壤中微生物筛选到能分解尿素的细菌。培养基成分如下表所示,实验步骤如图1所示。回答下列问题

KH2PO4
 

Na2HPO4
 

MgSO4·7H2O
 

葡萄糖
 

尿素
 

琼脂
 

1.4 g
 

2.1 g
 

0.2 g
 

10 g
 

1 g
 

15 g
 

将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1000mL,调pH7.2
 

 

1)分解尿素的细菌能分泌________酶,能将尿素分解成__________

2)培养基中为目的菌生长提供氮源和碳源的物质分别来自_________________。为了满足图示锥形瓶中目的菌对氧气的需求,在培养时应采用的操作方法是_______________________________

3)图中将细菌转到固体培养基上时,应采用________法接种以获得单个菌落。初步筛选出来的菌种还需要用生化的方法作进一步的鉴定,鉴定方法是检测初步筛选目的菌种培养基的pH,若pH_______(降低/不变/升高),说明该菌种能够分解尿素。

4A同学从培养基上筛选出大约150个菌落,而其他同学只选择出大约50个菌落。有同学认为造成A同学实验结果的原因是培养基被杂菌污染。为了证实该说法,则进一步实验的操作思路是________________

 

(1) 脲 氨 (2)尿素 葡萄糖 振荡培养 (3)稀释涂布 升高 (4)将A同学的培养基在不加土样的情况下,设置空白对照 【解析】 试题(1)分解尿素的细菌能分泌脲酶,能将尿素分解成氨。(2)培养基中加入尿素和葡萄糖的目的是为目的菌提供氮源和碳源。为了满足图示锥形瓶中目的菌对氧气的需求,在培养时应振荡培养,增大溶氧量。(3)转入固体培养基常采用平板划线法或稀释涂布平板法。检测初步筛选目的菌种培养基的pH,若pH升高,说明该菌种能够分解尿素,因为尿素分解后产生的氨呈碱性。(4)为了确定培养基是否被杂菌污染,应将A同学的培养基在不加土样的情况下,设置空白对照,观察实验结果。
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考点分析:
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无菌操作是微生物接种技术的关键;传统发酵技术和微生物分离、纯化、应用过程及植物组织培养和动物细胞培养过程中,均要无菌操作。回答下列相关问题:   

1)消毒和灭菌是两个不同的概念,灭菌是指彻底杀灭微生物使其永远丧失生长繁殖的能力。消毒仅指杀死一部分对人体有害的病原菌而对被消毒的物体基本无害。下列哪些事物适用于消毒处理__________

①皮肤  ②饮用水  ③牛奶 ④注射器 ⑤培养皿  ⑥接种环   ⑦培养基    ⑧果汁   ⑨酱油  ⑩手术刀           

A.①②③⑧⑨       B.④⑤⑥⑦⑩   C.①②③④⑤⑥⑧  D.以上全部

2)配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行调整_____________ 接种前要进行_____________ 在整个微生物的分离和培养中,一定要注意在无菌条件下进行。

3)在微生物的实验室培养中,获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。下图是利用_______法进行大肠杆菌接种,把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。为达到这一目的,操作上应注意:每次划线前要___________;冷却后从上一区划线末端开始划;首尾区_____________   

4)有位同学在家制作泡菜时,为避免杂菌污染而向泡菜坛中加入了青霉素,结果发酵失败,原因可能是______________________

 

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若某一稀释度下,平板上生长的平均菌落数为90,涂布平板时所用的稀释液体积为01mL,稀释液的稀释倍数为105,则每克样品中的活菌数约为(   

A.9×108 B.9×107

C.9×105 D.9×106

 

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植物的落叶在土壤里会逐渐腐烂成为腐殖质。河南某中学的兴趣小组对落叶腐烂的原因及不同土壤中微生物的分解能力进行了实验探究,下列有关叙述正确的是(   

A.若要验证落叶腐烂是由于土壤微生物的分解作用,则实验的自变量是土壤微生物的种类和数量,因变量是土壤微生物分解作用的有无,并以自然状态的土壤作对照组,以经杀菌处理的土壤作实验组

B.土壤中的各种动物及微生物共同组成群落,各种微生物在生态系统中均属于分解者

C.若用等量的热带雨林土壤代替本地样品土壤进行实验,土壤中未腐烂的落叶的含量将减少

D.土壤微生物对落叶的分解是通过微生物的呼吸作用实现的,与之相关的细胞器是线粒体

 

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下图表示培养和纯化X细菌的部分操作步骤,下列有关叙述正确的是(    ) 

A.步骤①操作时,倒好平板后应立即将其倒置,防止水蒸气落在培养基上造成污染

B.步骤②接种环和试管口应先在火焰上灼烧,接种环冷却后再放入试管中蘸取菌液

C.步骤③沿多个方向划线,使接种物逐渐稀释,培养后可根据出现的单个菌落计数

D.步骤④是将培养皿放在恒温培养箱中培养,一段时间后所得到的都是X细菌的菌落

 

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如图是微生物平板划线示意图。划线的顺序为12345。下列操作方法正确的是(  )      

A.操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌

B.划线操作须在火焰上进行

C.5区域中才可以得到所需菌落

D.12345区域中划线前后都要对接种环灭菌

 

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