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植物乳杆菌属于乳酸菌的一种,在繁殖过程中可分泌一类具有抑菌活性的蛋白质,此种蛋白...

植物乳杆菌属于乳酸菌的一种,在繁殖过程中可分泌一类具有抑菌活性的蛋白质,此种蛋白质称为细菌素,可作为良好的食品防腐剂。现有两种较高产细菌素的菌株,菌株A产细菌素能力强于菌株B,但菌株A细胞中的细菌素合成途径中缺少两个重要的调控基因plnCplnD,而菌株B细胞中具有这两个基因。研究人员按下图所示流程对菌株AB进行改良,获得了更高产细菌素的新型菌株C

1)从细胞结构的角度分析,植物乳杆菌属于________生物,其进行合成细菌素等生命活动所需的能量由________呼吸提供。

2)在进行融合前,需分别用溶菌酶去除AB两种菌株的________,制备成原生质体,再利用PEG进行诱导融合。

3)为鉴定融合菌株是否为AB融合菌株,需要进行相关检测。以下检测方法和结果中,最能说明融合菌株是AB融合菌株的是________

a.在电子显微镜下观察并测量菌体长度,发现融合菌株明显长于菌株A或菌株B

b.提取融合菌株的基因组DNA进行PCR检测,发现其中已含有基因plnCplnD

c.提取融合菌株的mRNA进行核酸分子杂交,发现其已转录基因plnCplnDmRNA

d.提取融合菌株的蛋白质进行抗原-抗体检测,发现其中含有菌株AB的特征蛋白

4)实验发现,植物乳杆菌对柠檬色葡萄球菌的抑菌效果最好,研究人员选择柠檬色葡萄球菌作为指示菌进行抑菌实验,来比较菌株ABC的产细菌素能力。实验步骤如下:

a.在平板培养基中涂布________

b.分别在平板的不同位置接种________作为实验组;对照组的处理是________

c培养一段时间后,观察并比较抑菌圈大小。

预期结果为:_________

5)抗生素是由微生物产生的具有较强抑菌杀菌效果的小分子有机物。请结合所学知识及相关信息,分析将细菌素而非抗生素用作食品防腐剂的优势__________。(答出一点即可)

 

原核 无氧 细胞壁 d 柠檬色葡萄球菌菌液 A、B、C菌液的上清液(蘸取A、B、C菌液的滤纸片) 接种等量无菌水(蘸取无菌水的滤纸片) 抑菌圈从大到小依次为C、A、B,对照组无抑菌圈 与抗生素不同,细菌素的化学本质是蛋白质,被人体食用后可被胃蛋白酶等消化酶降解,不会被吸收进入人体内,也不会破坏人体肠道益生菌,排放入环境中的量少,因此一般情况下,具有无毒、无副作用、无残留、少污染的优点 【解析】 1、按结构的复杂程度可将生物分为无细胞结构的生物(病毒)和有细胞结构的生物,有细胞结构的生物又可以依据有无核膜包被的细胞核分为真核生物和原核生物。 2、细胞融合的原理是细胞膜具有一定的流动性,有细胞壁的细胞融合前必须先去除细胞壁。 (1)乳杆菌属于乳酸菌的一种,属于细菌的一种,是原核生物;由于乳杆菌是厌氧性细菌,故进行合成细菌素等生命活动所需的能量由无氧呼吸提供。 (2)在进行融合前,需分别用溶菌酶去除A、B两种菌株的细胞壁,制备成原生质体,再利用PEG进行诱导融合。 (3)如果新菌株是由A、B融合而成的,那么它既有A的特有蛋白,又有B的特有蛋白,d正确,abc错误,故选d。 (4)植物乳杆菌对柠檬色葡萄球菌的抑菌效果最好,研究人员选择柠檬色葡萄球菌作为指示菌进行抑菌实验,来比较菌株A、B、C的产细菌素能力,故应该在平板培养基上涂布柠檬色葡萄球菌菌液,分别在平板的不同位置接种A、B、C菌液的上清液(蘸取A、B、C菌液的滤纸片)作为实验组,接种等量无菌水(蘸取无菌水的滤纸片)作为对照组,观察含有抑菌物质的滤纸片周围的抑菌圈大小,预期结果为抑菌圈从大到小依次为C、A、B,对照组无抑菌圈。 (5)将细菌素而非抗生素用作食品防腐剂的优势为:与抗生素不同,细菌素的化学本质是蛋白质,被人体食用后可被胃蛋白酶等消化酶降解,不会被吸收进入人体内,也不会破坏人体肠道益生菌,排放入环境中的量少,因此一般情况下,具有无毒、无副作用、无残留、少污染的优点。
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考点分析:
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肝脏是个特殊的免疫耐受器官。乙肝病毒(HBV)携带者肝脏中的T细胞表面存在高表达抑制性受体(TIGIT分子),其与肝脏等细胞表面的某信号分子结合后,会抑制T细胞活性,使肝脏处于免疫耐受状态,无损伤产生。为研究TIGIT分子在HBV免疫耐受维持中所起的作用,科研人员进行了相关的实验研究。

1)病毒侵入人体细胞后,__________与被侵染的靶细胞密切接触,引起靶细胞裂解死亡。导致病毒失去了__________生活的基础,因而能被吞噬、消灭。

2)科研人员利用乙肝病毒携带小鼠进行了实验,实验组注射抗TIGIT的单克隆抗体阻断TIGIT抑制通路,对照组注射等量的其他抗体,结果证明抗TIGIT的单克隆抗体能够发挥阻断作用。抗TIGIT的单克隆抗体能够阻断TIGIT分子通路的机理是___________

3)为研究TIGIT阻断后对肝脏免疫耐受的影响,研究人员进一步检测了血清中谷丙转氨酶(ALT)的含量,结果如图。血清中谷丙转氨酶的含量可作为检测肝脏细胞损伤程度的指标。

①与第1组结果对比可知,第___________组小鼠的肝脏处于免疫耐受状态。

②图中结果可说明第___________组小鼠肝脏发生了损伤。对小鼠肝脏细胞进行病理染色观察,也表现出同样的结果。推测该组肝脏细胞受损的原因是____________。而肝脏细胞受损,会增加发生肝癌的风险。说明TIGIT分子在HBV免疫耐受的维持中发挥着重要作用。

4)有人说机体的免疫调节越敏感越好,你是否同意此说法_______?结合本实验的研究简要说明理由_______________________

 

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种子萌发是一个非常复杂的过程,受到多种因素的影响。为研究水稻中的PLA3基因在参与脱落酸(ABA)调控水稻种子萌发中的作用,研究人员进行了系列实验。

1)图1显示水稻种子在不同处理培养16h后的萌发情况,结果表明ABA作为一种植物激素能够______种子萌发,它与赤霉素(GA)对种子萌发的作用存在______关系。

2)在水稻突变体pla3中,PLA3基因由于编码区缺失一个碱基对而发生了__________的改变,导致其通过转录产生的mRNA_________________,使得翻译出的PLA3蛋白所含氨基酸数目多于野生型水稻(WT)中的PLA3蛋白。这种加长PLA3蛋白没有生物活性。

3)研究人员以野生型水稻(WT)种子和pla3种子为材料,研究PLA3基因在参与ABA调控水稻种子萌发中的作用。

①将两种种子分别置于无ABA和含一定浓度ABA的环境中培养,观察并统计种子的萌发率(如图2)。由结果可知,在WT种子中,PLA3基因的作用是________种子萌发。图中种子萌发后________萌发率的差值可反映出ABA处理对pla3种子的作用。综合图中四组实验结果,可推知PLA3基因功能丧失使得________

②研究发现,pla3种子中的ABA含量显著低于WT种子。研究人员对种子中相应基因的表达量进行检测,结果如图3

3综合相关信息分析,在野生型水稻种子中,PLA3基因在参与ABA调控种子萌发中的作用是___________

 

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果蝇体细胞的X染色体上有一区段编号为16A(其上有多个基因),Y染色体没有该区段。野生型果蝇成虫体细胞的X染色体都只有116A区段,表现为圆眼。有些果蝇体细胞中1X染色体上有216A区段,这些果蝇眼睛窄小,表现为棒眼。此外有些果蝇体细胞中1X染色体上有316A区段,眼睛非常窄小,表现为超棒眼。

1)果蝇眼形状的变异类型属于__________。果蝇一条X染色体上16A区段_________,眼睛越窄小。

2)研究人员培育出一种棒眼雌蝇,其X染色体上的刚毛、翅脉两对基因及16A区段如图1所示。此种棒眼雌蝇与叉毛合脉棒眼雄蝇杂交后产生大量子代,结果见下表

子代

性状

棒眼

圆眼

超棒眼

野生、

野生

叉毛、

合脉

野生、

野生

叉毛、

合脉

叉毛、

野生

野生、

合脉

叉毛、

野生

数量

5413

3749

5218

4160

1

2

1

 

 

据杂交实验结果分析,子代中出现圆眼和超棒眼雄蝇的原因是亲本果蝇中的__________在减数分裂过程中发生__________,产生异常配子。请将该种亲本果蝇可能形成的所有异常配子染色体图画在方框中__________

 

3)大量观察发现,超棒眼雌蝇中不存在纯合子和含有216A区段的杂合子,推测可能的原因是这两种类型的果蝇不能成活。研究人员设计如下杂交实验进行验证。选取多只超棒眼雌蝇与棒眼雄蝇杂交。若各组杂交后代性状及比例为__________,则推测正确。

 

4)果蝇为变态发育,幼虫与成虫各部分的形态结构存在极大差异。为研究16A区段中的BarH基因表达的蛋白质在果蝇成虫眼形成过程中的作用。研究人员首先需要从野生型果蝇发育的不同阶段提取RNA,用32P标记的__________片段做探针进行检测,结果如图2。再通过制备的特异性___________,检测野生型和突变体果蝇__________期细胞的BarH蛋白质的有无,然后进行下一步的分析和研究。

 

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阅读下列材料,回答(1)~(4)题。

肿瘤细胞中相关基因甲基化修饰调节细胞自噬过程

细胞自噬是真核生物对细胞内物质进行周转的重要过程。细胞自噬过程中,一些损伤的蛋白或细胞器被双层膜结构包裹后形成自噬体,与溶酶体(动物)或液泡(酵母和植物)融合后,其内的物质被降解后得以循环利用。下图表示细胞内自噬体的形成及溶酶体参与自噬的过程。

细胞自噬过程受到自噬相关基因调控, 但是这些基因的表达过度上调会导致自噬异常激活, 最终引起“自噬性细胞死亡”。细胞自噬在细胞废物清除、结构重建、生长发育中起重要作用, 而自噬功能紊乱则会导致肿瘤发生、神经退行性疾病和微生物感染等问题。

在机体肿瘤发生早期, 细胞自噬促进癌细胞发生凋亡以抑制肿瘤发生;而在肿瘤发生晚期,恶性肿瘤增殖达到相当数量时, 肿瘤细胞要借助细胞自噬作用对抗营养缺乏和缺氧以及放射造成的损伤。肿瘤细胞抑癌基因DNA甲基化(有多个碱基上连接甲基基团)可能具有调节细胞自噬的作用。

NOR1是一种抑癌基因,鼻咽癌细胞中NOR1的启动子呈高度甲基化状态,导致NOR1蛋白含量很低。当用DNA甲基抑制剂处理鼻咽癌细胞后,NOR1表达得到恢复,抑制了自噬体囊泡的形成, 癌细胞的自噬作用受到抑制, 能量代谢和细胞活性下降,癌细胞的增殖和生存能力降低。

抑癌基因PCDH17在胃和结肠直肠细胞中表达正常, 而在胃癌和结肠直肠癌细胞中高度甲基化而近乎沉默。研究表明,PCDH17低表达与其基因甲基化及蛋白乙酰化有关。进一步研究发现,当细胞中PCDH17基因过量表达后,多个自噬相关基因表达上调,细胞自噬作用增强,癌细胞中发生自噬性细胞死亡的比例上升,从而达到抑癌效果。

1)图示细胞自噬过程中,内质网膜由于具有____________的特点,可将损伤的细胞器包裹成自噬体。自噬体与溶酶体融合后,其内的多种____________将损伤细胞器降解以循环利用。

2)分析文中“鼻咽癌细胞中NOR1的启动子呈高度甲基化状态,导致NOR1蛋白含量很低”的原因是_______________

3)结合文中信息,简要说明抑癌基因NOR1PCDH17抑制细胞癌变的作用机制分别是_____________________________

4)除文中提到的两个抑癌基因的作用机制外,结合所学知识,推测抑癌基因还可以通过调控哪些途径达到抑制细胞癌变的作用_______________。(提出一点即可)

 

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高赖氨酸血症是由于线粒体内分解赖氨酸的A酶缺乏而引起的代谢紊乱疾病,分I型和II型。患者血液中赖氨酸浓度皆偏高,I型患者症状不明显,II型患者发育迟缓。科研人员对其发病机制进行了研究。

1)赖氨酸是人体必需氨基酸,摄入人体的赖氨酸除用于合成蛋白质外,还可经过脱氨作用后进入有氧呼吸过程,最终被分解成_______,并为生命活动供能。

2)赖氨酸进入线粒体后降解途径如图1,图1A酶由LKRSDH两部分组成。据图分析,赖氨酸在线粒体膜上________的协助下进入线粒体中与a-酮戊二酸结合,在LKR催化下形成_________,后者在_________催化下被分解。

3)编码A酶的A基因突变会造成高赖氨酸血症。科研人员以秀丽线虫为材料,经诱变得到了表皮细胞线粒体异常增大的A基因突变体甲,将A酶的LKRSDH基因分别在甲的细胞中表达,发现SDH可以将其中的线粒体回复到野生型而LKR不能。而已知的LKRSDH均受损的线虫突变体乙表皮细胞线粒体不增大。说明只有在________情况下会引起线粒体异常增大。

4)进一步通过实验研究野生型、LKR突变和SDH突变小鼠,结果如图2

推测I型和II型高赖氨酸血症分别是因_______引起的。综合以上信息解释II型高赖氨酸血症出现图2中结果的机理是_________

 

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