Question

新型冠状病毒和SARS病毒都会造成肺炎。下图是SARS-CoV S蛋白特异性单克隆抗体的制备过程。回答下列问题：

（1）若只考虑细胞两两融合，图中甲理论上有________________种。

（2）已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。鼠的淋巴细胞有上述两种途径，但一般不分裂增殖：鼠的骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能不断分裂增殖。根据该原理，在含甲的混合培养液中添加氨基嘌呤______________（填能或不能）筛选出A，原因是_____________________________。

（3）在 SARS-CoV S蛋白特异性单克隆抗体的制备过程中，需要用到动物细胞培养和动物细胞融合技术。一般来说，动物细胞培养需要的条件有__________________（至少答出两点）；诱导动物细胞融合的方法有_________________________（至少答出两种）。

（4） SARS-CoV S蛋白单克隆抗体______________（填能或不能）对新型冠状病毒发挥作用，理由是__________________________________。

Answer

3 能 杂交瘤细胞DF途径被氨基嘌呤阻断后不能合成DNA，但可通过S途径合成DNA，不断分裂增殖 无菌、无毒环境，营养，温度、PH，气体环境 PEG、灭活的病毒、电激 不能 新型冠状病毒与SARS病毒的抗原不同，SARS-CoVS蛋白单克隆抗体，只能与SARS-CoVS蛋白发生特异性结合

【解析】

图示单克隆抗体的制备过程是：对小鼠注射抗原SARS-CoV S蛋白，从小鼠的脾脏中获取经过免疫的B细胞（即效应B细胞），将经过免疫的B细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，克隆化培养杂交瘤细胞（体内培养和体外培养），最后获取单克隆抗体。诱导动物细胞融合的方法有：物理法（离心、振动）、化学法（聚乙二醇）、生物法（灭活的病毒）；单克隆抗体的两次筛选：①筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）；②筛选出能够产生特异性抗体的细胞群；两次抗体检测：专一抗体检验阳性。

（1）只考虑细胞两两融合，甲理论上有3种融合细胞，包括两个骨髓瘤细胞融合的类型，两个已免疫的B细胞融合的类型，一个骨髓瘤细胞与一个已免疫B细胞融合的类型。

（2）在含甲的混合培养液中添加氨基嘌呤后，已免疫的B细胞及其彼此融合的细胞能利用S途径进行DNA合成，但是无法进行分裂增殖，骨髓瘤细胞的D合成途径被阻断，所以骨髓瘤细胞及其彼此融合的细胞就不能增殖，只有骨髓瘤细胞与已免疫的B细胞融合形成杂种细胞能利用S途径合成DNA并进行分裂增殖从而存活下来，所以在含甲的混合培养液中添加氨基嘌呤能筛选出杂交瘤细胞A。

（3）动物细胞培养的条件包括以下几点：①无毒、无菌的环境；②营养物质：无机物（无机盐、微量元素等），有机物（糖、氨基酸、促生长因子等）；③血清和血浆 (提供细胞生长必须的营养成份)；④适宜的温度和pH等；诱导动物细胞融合的方法有物理诱导法、化学试剂诱导法和生物诱导法。

（4）抗体具有特异性，针对特定的病毒人体会产生相对应的抗体，故相应的SARS-CoVS蛋白单克隆抗体只会对SARS这种病毒起作用，不能对新型冠状病毒发挥作用。