Question

分离土壤中尿素分解菌的实验操作中，对于获得纯化的尿素分解菌的单菌落影响最大的是（    ）

A.牛肉膏蛋白胨培养基中添加尿素作为氮源

B.涂布前涂布器未在酒精灯外焰上灼烧灭菌

C.制备浸出液的土壤取自土壤的表层

D.接种操作者的双手未用酒精棉进行消毒

Answer

A

【解析】

1、实验流程：土壤取样→样品的稀释→将稀释液涂布到以尿素为唯一氮源的培养基上→挑选能生长的菌落→鉴定。
2、实验室中目的菌株的筛选：
①原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度。pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。
培养基选择分解尿素的微生物的原理：培养基的氮源为尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物
②方法：能合成脲酶的细菌才能分解尿素。配制以尿素为唯一氮源的培养基，能够生长的细菌就是能分解尿素的细菌。

A、该培养基必须以尿素为唯一的氮源，不能使用牛肉膏蛋白胨培养基或在其中添加尿素作为氮源，该操作对实验影响最大，A正确；
B、涂布前涂布器未在酒精灯外焰上灼烧灭菌，这会导致杂菌污染，可能影响微生物计数，但对获得纯化的尿素分解菌的单菌落影响不大，B错误；

C、取样一般取距离地表约3～8cm的土壤层，而土壤的表层中微生物数量也很大，因此该操作对获得纯化的尿素分解菌的单菌落影响不大，C错误；
D、接种操作者的双手未用酒精棉进行消毒，可能会造成污染，但与纯化的尿素分解菌的单菌落有关但影响不大，D错误。

故选A。