Question

某校生物研究性学习小组的同学欲调查某冷饮店的冰块中大肠杆菌的含量。具体实验步骤如下:

第一步:配置培养基（成分：蛋白胨、氯化钠、乳糖、水、X和琼脂）；

第二步:制作无菌平板；

第三步:设置空白对照组和实验组，对照组接种①，实验组接种②。

第四步:将各组平板置于37℃恒温箱中培养一段时间，统计各组平板上菌落的平均数。

回答下列问题:

（1）培养基中的乳糖可以为大肠杆菌提供________。为了方便大肠杆菌的鉴定，需要在培养基中添加成分X _______________，在该培养基表面，大肠杆菌的菌落呈现 ______（填颜色）。

（2）完善步骤三，①是__________________________ ，②是 ______________________________________ 。

（3）若该小组在空白对照组的平板上检测到少许菌落，请分析可能的原因:_________________________________________________________ 。

（4）将1mL冰块水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37，据此可得出每升水样中的活菌数为 ___________________ 。

Answer

碳源 伊红美蓝 黑色 适量无菌水 等量冰块水 培养基灭菌不合格或倒平板（接种）过程被污染 3.8×107

【解析】

1、培养基按功能划分：分为选择培养基和鉴别培养基；

选择培养基（1）、特点：培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需的微生物的生长。（2）、应用：培养、分离出特定微生物（如培养酵母菌和霉菌，可在培养基中加入青霉素；以脂肪为唯一碳源的培养基用于分离含有脂肪酶的细菌）；

鉴别培养基（1）、特点：根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品。（2）、应用：鉴别不同种类的微生物（如可用伊红-美蓝培养基鉴别饮用水或乳制品中是否含有大肠杆菌）。

2、微生物的计数方法包括显微镜直接计数法和间接计数法（常用稀释涂布平板法）。

稀释涂布平板法的理论依据：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落即代表一个活菌。为了保证结果准确，一般选择菌落数在30-300的平板进行计数，每个稀释倍数至少涂布3个平板进行计数，取平均值。计算公式每毫升样品中的菌株数=（C/V）M，其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（ml），M代表稀释倍数。

（1）培养基中的乳糖可以为大肠杆菌提供碳源，伊红美蓝培养基是一种鉴别培养基是用来鉴别大肠杆菌的，若有大肠杆菌,则其菌落呈现黑色。

（2）空白对照就要看培养基是否合格，故对照组接种适量无菌水，实验组接种等量冰块水。

（3）若培养基灭菌不合格或接种过程中被污染，那么在空白对照组的平板上也会检测到菌落。

（4） 由由题意知1ml水样中的菌落数是（39+38+37）÷3÷0.1×100=3.8×104个，每升水样中的活菌数为3.8×104×103=3.8×107。