Question

借助生物技术，酵母菌在人们生活中发挥了独特的作用，如在酿酒业中的应用。请回答下列与酵母菌有关的问题：

（1）制作果酒需要的微生物是酵母菌，在酵母菌的分离与纯化过程中，需将培养基的pH调至_________性。果酒配制过程中，若要检测果酒中活体酵母菌的密度，一般采用__________法，但此种方法最终计算得出的菌体数往往比实际数目__________。

（2）固定化酵母细胞在啤酒生产中发挥了重要作用，酵母细胞固定化的大致程序为：活化酵母细胞→配制CaCl₂溶液→配制海藻酸钠溶液→海藻酸钠溶液与酵母细胞混合→固定化酵母细胞。

①“活化酵母细胞”是指________________________________________。

②在制备固定化酵母细胞过程中，若固定化得到的凝胶珠颜色过浅且呈白色，说明__________。

③两图是用固定化酵母细胞发酵葡萄糖溶液前、后的示意图，你认为固定化酵母细胞发酵葡萄糖溶液后的是图__________，你的判断理由是____________________。

Answer

酸 稀释涂布平板 低 让处于休眠状态的酵母细胞重新恢复正常生活状态 海藻酸钠的浓度较低，固定酵母细胞数目较少 乙 固定化的酵母细胞利用溶液中的葡萄糖产生酒精和二氧化碳，结果凝胶珠内包含的二氧化碳气泡使凝胶珠悬浮于溶液上层

【解析】

1、接种微生物常用的两种方法：

①平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。

②稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。

2、固定化细胞的相关知识点，制作过程中的注意事项：

（1）酵母细胞的活化。（2）配置氯化钙溶液：要用蒸馏水配置。（3）配制海藻酸钠溶液：小火、间断加热、定容，如果加热太快，海藻酸钠会发生焦糊。（4）海藻酸钠溶液与酶母细胞混合：冷却后再混合，注意混合均匀，不要进入气泡。（5）制备固定化酵母细胞：高度适宜，并匀速滴入。

（1）酵母菌适宜生存在富含糖和酸性的环境中，因此在酵母菌的分离与纯化过程中，需将培养棊的pH调至酸性。接种微生物常用平板划线法和稀释涂布平板法，其中稀释涂布平板法可对微生物进行计数，因此若要检测果酒中活体酵母菌的密度，一般采用稀释涂布平板法。由于当两个或多个菌体连在一起时，平板上计数的是一个菌落，所以此种方法最终计算得出的菌体数往往比实际数目偏小。

（2）①“活化酵母细胞”是指让处于休眠状态的酵母细胞重新恢复正常生活状态。

②在制备固定化酵母细胞过程中，如果海藻酸钠溶液浓度过低，则形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞数目少，凝胶珠的颜色偏浅。

③固定化的酵母细胞利用溶液中的葡萄糖产生酒精和二氧化碳，结果凝胶珠内包含的二氧化碳气泡使凝胶珠悬浮于溶液上层，因此固定化酵母细胞发酵葡萄糖溶液后的是图乙。