Question

β-甘露聚糖酶能分解甘露聚糖，在食品、医药等方面有着广泛的应用，从土壤中筛选能产生该酶的枯草芽孢杆菌。请回答下面问题：

（1）用于培养微生物的培养基，除了提供微生物生长必需的营养物质之外，还需要满足微生物对________（至少答两点）的要求。

（2）在污水沟、死树桩旁采集土样，在纯化培养该菌之前，一般会进行选择培养，其目的是__________。

（3）经梯度稀释后获得的菌液一般用______________________法将其接种于选择培养基上，配制该选择培养基的步骤是_________________________________________________。

（4）已知枯草芽孢杆菌在含有甘露聚糖的培养基生长，经染色剂染色后，在平板上会形成无色透明圈。实验人员欲利用选择培养基筛选出高产β-甘露聚糖酶的枯草芽孢杆菌，请写出实验思路_____________________。

Answer

pH、特殊营养物质（如维生素）、氧气 增大枯草芽孢杆菌的浓度 涂布平板 计算→称量→熔化→灭菌→倒平板（或计算→称量→熔化→调节pH值灭菌→倒平板） 用含有甘露聚糖的培养基培养不同菌株（或将稀释后的土样接种在含有甘露聚糖的培养基上培养），一定时间后，通过测定菌落周围透明圈的大小（或直径）来确定不同菌株产β-甘露聚糖酶能力的大小

【解析】

实验室培养微生物的培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐等营养物质，此外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。微生物常见的接种方法包括平板划线法和稀释涂布平板法。微生物筛选的原理是：人为提供有利于目的菌株生长的条件，同时抑制或阻止其他微生物的生长，所使用的培养基为选择培养基。

（1）用于培养微生物的培养基，除了提供微生物生长必需的营养物质之外，还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。

（2）在污水沟、死树桩旁采集土样，在纯化培养该菌之前，一般会进行选择培养，其目的是增大枯草芽孢杆菌的浓度，以确保能够从样品中分离到所需的枯草芽孢杆菌。

（3）经梯度稀释后获得的菌液一般用涂布平板法法将其接种于选择培养基上，配制该选择培养基的步骤是计算→称量→熔化→灭菌→倒平板。

（4）欲利用选择培养基筛选出高产β-甘露聚糖酶的枯草芽孢杆菌，可选用含有甘露聚糖的培养基培养不同菌株（或将稀释后的土样接种在含有甘露聚糖的培养基上培养），一定时间后用染色剂染色，通过测定菌落周围透明圈的大小（或直径）来确定不同菌株产β-甘露聚糖酶能力的大小，透明圈直径与菌落直径之比最大的菌株，则为产β-甘露聚糖酶能力强的菌株。