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质粒P含有氨苄青霉素抗性基因(Ampr)和四环素抗性基因(Tetr),外源DNA...

质粒P含有氨苄青霉素抗性基因(Ampr)和四环素抗性基因(Tetr),外源DNA的插入会导致插入部位基因的失活。重组人干扰素a-1b是我国第一个国内批准生产的基因工程药物。下图所示为利用质粒P和人干扰素基因构建基因表达载体P1的示意图。回答下列问题:

限制酶

EcoR V

Sau3AI

BamH I

识别序列及切割位点


 


 


 

 

 

1)据图分析,为便于过程①所获得的目的基因片段能够顺利与质粒P连接,需要在目的基因片段加上__________序列。成功导入P1的受体菌落具有的抗药性特点为__________

2)过程③用到的酶为__________。为了保证目的基因能够正常表达,在构建P1时需要将目的基因插入__________之间。

3)科学家最早就是利用基因工程方法在大肠杆菌和酵母菌细胞内获得了干扰素,利用大肠杆菌作为受体菌的优点是____________________。以大肠杆菌为受体细胞时通常用人特定细胞的mRNA为材料来获得cDNA,其原理是______________________________

4)若要检测是否表达出干扰素,可用__________(物质)对工程菌中提取的蛋白质进行检测。

 

GATC 具有四环素抗药性,没有氨苄青霉素抗药性 BamHⅠ和DNA连接酶 启动子和终止子 繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少 在逆转录酶的作用下,以mRNA为模板按照碱基互补配对的原则可以合成cDNA 干扰素抗体 【解析】 分析题图:图中①为获取目的基因的过程,②表示利用PCR技术扩增目的基因,③表示构建基因表达载体的过程。 (1)由图可知,目的基因两侧都是黏性未端,根据表中三种限制酶的识别序列和切割位点(EcoRV酶切形成的是平末端,Sau3AI和BamHI酶切形成的末端都是黏性末端,且碱基序列均为GATC)可知,因此还需在引物的一端加上GATC序列,以便于P1的构建和筛选。若用Sau3AI切割会同时破坏氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因,若用限制酶ECoRV切割,产生的是平末端,且会破坏复制原点,因此不能用EcoRV和Sau3AI切割,应该用BamHI切割,其会破坏氨苄青霉素抗性基因,不会破坏四环素抗性基因,因此成功导入P1的受体菌落具有四环素抗药性,没有氨苄青霉素抗药性。 (2)据上分析可知,过程③表示构建基因表达载体的过程,需要用到限制酶和DNA连接酶,其中限制酶为BamHⅠ。为了保证目的基因能够正常表达,在构建P1时需要将目的基因插入启动子和终止子之间。 (3)大肠杆菌具有繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少等特点,常利用大肠杆菌作为受体菌。在逆转录酶的作用下,以mRNA为模板按照碱基互补配对的原则可以合成cDNA,故常用人特定细胞的mRNA为材料来获得cDNA。 (4)若要检测是否表达出干扰素,可用干扰素抗体对工程菌中提取的蛋白质进行检测。
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考点分析:
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近年来,人们用实际行动诠释着“绿水青山就是金山银山”的理念。随着生态学的研究进展,人们逐渐认识到各种“干扰”在生态建设中的重要意义,“干扰”是指引起群落、生态系统结构及特性发生变化的因素,在生态系统中,物种对“干扰”的忍受能力和它的竞争能力之间存在一个平衡。生态学家在塞罕坝林场恢复的过程中做了大量的研究,请回答下列相关问题:

1)长期施用化肥会造成土壤酸化,餐厨垃圾可加工成“有机肥”,实现垃圾的再利用。研究人员选定林场甲、乙两块地,分别长期施用餐厨“有机肥”和化肥后,调查结果如下。

据图分析,甲地与乙地相比,长期施用餐厨“有机肥”的优势是____________________

2)采伐是影响森林更新的主要人为“干扰”因素之一,适度采伐所形成的林隙,可更新树种的种类和数量。一般林隙中更新树种的种类和数量常多于树冠下,分析其原因是____________

3)有人提出“对退化的林地不能只是单纯的保护,也应适度的干扰来提高生物多样性”,提出这一观点的理由是:________________________________________________

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在人类文明的发展进程中,不断遭受到病毒的侵袭,病毒与癌症的发生密切相关,如宫颈癌、肝癌、鼻咽癌均可由病毒致癌因子引起。近年来科学家在癌症免疫治疗方面取得突破性进展,研究发现,T细胞膜上CTLA-4分子和PD-1蛋白与防止T细胞失控有关,防止过度活跃的免疫系统对机体造成伤害。请回答下列问题:

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间作可提高土地利用率,但作物之间又存在着激烈的竞争。研究小组研究甲、乙两种作物的间作效果,在一定的CO2和温度条件下(CO2为大气中的浓度,温度为20℃,该温度是当地白天的平均气温,光合作用和呼吸作用有关酶的最适温度都高于20℃),测得甲、乙两种植物光合速率与呼吸速率的比值(P/R)随光照强度变化的曲线图(甲、乙表示单作情况下,甲、乙表示间作情况下)。请回答下列问题:

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P

F1

F2

实验一

焦刚毛雌果蝇×野生型雄果蝇

均为直刚毛

直刚毛:焦刚毛=31

实验二

焦刚毛雄果蝇×野生型雌果蝇

均为直刚毛

直刚毛:焦刚毛=31

 

 

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细胞中的少部分ATP会在酶的催化下形成cAMPcAMP在调节细胞代谢方面发挥重要作用。下图甲是肾小管上皮细胞部分生理过程图解,图乙是该细胞膜局部亚显微结构图解,请回答相关问题:

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