Question

回答下列（一）、（二）小题。

（一）某工厂为了生产耐高温植酸酶饲料添加剂，开展了该酶菌株的筛选、酶的固定化及其特性分析研究，其流程如下图所示。请回答下列问题：

（1）土壤悬液首先经80℃处理15分钟，其目的是筛选出_______________。

（2）在无菌条件下，将经过处理的土壤悬液进行______________，然后涂布在含有植酸钠的固体培养基上。培养后观察到______________，其周围出现透明水解圈，______________比值大小与该菌所产植酸酶数量多少、活性强弱相关。

（3）筛选获得的菌株经鉴定后，将优良菌株进行液体扩大培养，培养时需要振荡，其主要目的是______________。

（4）常用固定化植酸酶处理饲料，其主要优点有________________________和可连续处理等。在建立和优化固定化植酸酶处理工艺时，除考虑_________________________、酶反应的温度、pH、作用时间等环境因素外，还需考虑的主要有固定化的方法和固定化________________。

（二）人类在预防与诊疗传染性疾病过程中，经常使用疫苗和抗体。已知目前全世界流行的新型冠状病毒为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原，其疫苗生产和单克隆抗体制备的流程之一如图所示。请据图分析并回答下列问题：

（1）在基因工程中，图中A蛋白基因属于__________基因。

（2）图示B淋巴细胞来自__________（填器官），小鼠骨髓瘤细胞可以通过动物细胞培养形成不死性的____________________。

（3）过程③采用的实验技术是__________，获得的X是__________。

（4）对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的__________所制备的疫苗。对该传染病疑似患者确诊时，可从疑似患者体内分离病毒，与已知病毒进行____________________比较，或用图中的____________________进行特异性结合检测。

Answer

耐高温菌株 稀释 单菌落 透明圈与菌落的直径 增加培养液溶解氧 提高植酸酶的稳定性 植酸酶的活性和用量 所用的介质 目的 脾脏 癌细胞 动物细胞融合 杂交瘤细胞 A蛋白 核酸序列 抗A蛋白的单克隆抗体

【解析】

1、微生物的筛选与分离需要使用选择培养基.常用的接种方法主要有平板划线法和稀释涂布平板法.固定化酶和固定化细胞的方法主要有包埋法、物理吸附法和化学结合法.影响酶的活性的因素主要有温度和pH等。

2、分析题图：图示为疫苗生产和抗体制备的流程之一，其中①表示逆转录过程；②是获取目的基因；③是小鼠骨髓瘤细胞和效应B淋巴细胞融合的过程；X为杂交瘤细胞。

（一）（1）土壤悬液首先经80℃处理15分钟，目的是使大多数的不耐高温的微生物死亡而筛选出耐高温菌株。

（2）土壤悬液在无菌条件下进行梯度稀释，使用稀释涂布平板法接种涂布于含有植酸钠的固体培养基上，经培养后可以观察到单菌落的出现，且出现透明圈，透明圈与菌落的直径比值大小与该菌所产植酸酶数量多少、植酸酶的活性强弱相关。.

（3）振荡培养的目的是向培养液供氧，同时使微生物与培养液充分接触，有利于微生物的繁殖与生长。

（4）常用固定化植酸酶处理饲料，其主要优点有提高植酸酶的稳定性和可连续处理等。在建立和优化固定化植酸酶处理工艺时，除考虑植酸酶的活性和用量、酶反应的温度、pH、作用时间等环境因素外，还需考虑的主要有固定化的方法和固定化所用的介质。

（二）（1）在基因工程中，图中A蛋白基因属于目的基因。

（2）对小鼠进行注射A蛋白抗原，一段时间后从小鼠脾脏提取出B淋巴细胞，小鼠骨髓瘤细胞可以通过动物细胞培养形成不死性的癌细胞。

（3）③是动物细胞融合过程，需采用动物细胞融合技术；经过获得的融合细胞有3种，即骨髓瘤细胞自身融合的细胞、效应B细胞自身融合的细胞和杂交瘤细胞，图中X就是杂交瘤细胞。

（4）对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的A蛋白所制备的疫苗.对该传染病疑似患者确诊时，可以从疑似患者体内分离出病毒，与已知病毒进行核酸序列比较；或采用抗原-抗体杂交法，即用图中的抗A蛋白的单克隆抗体进行特异性结合检测。