Question

应用动物乳腺生物反应器生产药用蛋白具有生产方式简单产量大、蛋白能进行翻译后修饰等优点，是具有广阔前景的生物医药产业。回答以下相关问题：

（1）科学家应用动物乳腺生物反应器生产药用蛋白，需将___________与___________等调控组件重组在一起，通过______________________等方法，导入哺乳动物的___________中，进而获得转基因动物，再从转基因动物的乳汁中获取药物蛋白。

（2）转基因动物乳腺生物反应器的鉴定

第一步：DNA水平的检测判明是否为转基因动物，使用的___________须非常特异，要根据启动子调控序列和目的基因序列精心设计。

第二步：RNA水平的检测目的是鉴定___________情况。

第三步：目的蛋白的检测可采用___________技术，依据的原理是______________________。

Answer

药用蛋白基因 乳腺蛋白基因的启动子 显微注射 受精卵 探针 目的基因转录 抗原抗体杂交 抗原与抗体特异性结合

【解析】

基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．

（4）目的基因的检测与鉴定：（1）分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术；（2）个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

（1）利用乳腺生物反应器生产药用蛋白，需要将目的基因（药用蛋白基因）和乳腺蛋白基因的启动子结合，构成重组DNA，将重组DNA导入动物细胞，通常使用显微注射法，受体细胞常用受精卵。

（2）第一步：DNA水平鉴定方法，常用分子杂交技术，需要设计探针；

第二步：RNA水平鉴定是检测该目的基因是否转录。

第三步：检测蛋白质使用抗原抗体杂交技术，因为抗原与抗体特异性结合。