Question

植物在培养过程中容易被病毒感染，且病毒的DNA随细胞的分裂而复制。茎尖分生区细胞一般来说不含病毒，茎尖培养脱毒法已经成为植物无毒苗生产中应用最广泛的一种方法。请回答下列有关脱毒苗培育和检测的相关问题：

（1）利用茎尖培养脱毒苗依据的生物学原理是______________，培养过程中，培养基中需要加入的植物激素有_____________。植物茎尖分生区细胞一般不含病毒，原因可能是__________________。

（2）RT–PCR技术以mRNA为模板合成cDNA，再进行PCR扩增，可用于检测植物病毒。利用mRNA合成cDNA时，反应体系中需要加入的原料是_________；加入RNA酶抑制剂，目的是_________。PCR过程中除了加入DNA模板外，还需要加入合成的短序列的DNA单链作为_________。

（3）可以用单克隆抗体检测脱毒苗是否含有病毒，制备单克隆抗体时要先用病毒的抗原多次免疫小鼠，再提取小鼠的_________两种细胞进行融合。单克隆抗体用于检测植物病毒的突出优点是_________。

Answer

植物细胞的全能性 生长素和细胞分裂素 茎尖分生区细胞的分裂速度比病毒的复制速度快 4种脱氧核苷酸 防止mRNA被RNA酶催化水解 引物 B淋巴细胞和骨髓瘤细胞 特异性强、灵敏度高

【解析】

1、植物组织培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、芽，最终形成植物体。植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。

2、植物组织培养过程中培养基中添加的生长素和细胞分裂素的作用是启动细胞进行有丝分裂，诱导离体的组织或细胞经过脱分化形成愈伤组织，再经过再分化形成幼苗。

3、单克隆抗体的特异性强，针对性更高，灵敏度高，产量也大大高于血清抗体。

（1）利用植物茎尖培养脱毒苗使用的技术是植物组织培养，植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。植物组织培养过程中需要加入的激素是生长素和细胞分裂素。根据题意可知，病毒的DNA随细胞的分裂而复制，茎尖分生区细胞的分裂速度比病毒的复制速度快，所以茎尖分生区细胞一般来说不含病毒。

（2）提取mRNA合成cDNA是逆转录过程，需要逆转录酶和4种脱氧核苷酸；加人RNA酶抑制剂能防止mRNA被RNA酶催化水解。PCR过程中加入的短序列的DNA单链作为引物，以便扩增目的基因。

（3）单克隆抗体培养时应选择B淋巴细胞和骨髓瘤细胞进行融合，单克隆抗体用于检测植物病毒的突出优点在于特异性强、灵敏度高。