Question

放线菌是一类具有分枝菌丝的特殊菌群，其生长比一般细菌缓慢，在筛选中它的生长经常会受到快速生长菌的抑制，因此放线菌的分离筛选比较困难。自然界中绝大多数的抗生素都是放线菌产生的。回答下列问题：

（1）混合菌样品的预处理和培养条件是影响放线菌筛选的两个主要因素。常用到的预处理有加热、干燥、苯酚、强碱等，这说明放线菌相对于一般的细菌孢子，抗逆性___________。

（2）利用特殊的营养源，以及添加___________来抑制细菌生长从而选择培养放线菌也是常用的一种方法。另外，添加重铬酸钾的培养基也可以有效地抑制样品中的细菌和真菌。这两种方法用到的培养基都从功能上属于_________________________。

（3）初步筛选后的放线菌可用改良后的高氏一号培养基（可溶性淀粉20g，KNO₃ 1g，NaCl 0．5g，K₂HPO₄ 0．5g，MgSO₄ 7H₂0 0．01g，蒸馏水1L，琼脂18g，pH7．2- 7．4）进行纯化培养，其中可溶性淀粉是放线菌生长的主要___________源，_____________是氮源。配制培养基时，灭菌与调pH的先后顺序是________________。

（4）对放线菌实现分离后，如需对其进行活菌计数，可采用______________法，在此方法中，当样品稀释度足够高时，培养基表面生长的一个__________，来源于样品稀释液中的一个活菌。

Answer

强 抗生素 选择培养基 碳 KNO3 调pH在前，灭菌在后 稀释涂布平板 菌落

【解析】

1、从微生物的混合物中筛选目的微生物需要使用选择培养基，选择培养基是指通过培养混合的微生物，仅得到或筛选出所需要的微生物，其他不需要的种类在这种培养基上是不能生存的。

2、微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

（1）混合菌样品的预处理和培养条件是影响放线菌筛选的两个主要因素。常用到的预处理有加热、干燥、苯酚、强碱等，这说明放线菌相对于一般的细菌孢子，抗逆性强。

（2）由于放线菌可以产生抗生素，因此利用特殊的营养源，以及添加抗生素来抑制细菌生长，从而选择培养放线菌是常用的一种方法。在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。这两种方法用到的培养基从功能上都属于选择培养基。

（3）高氏一号培养基中可溶性淀粉是放线菌生长的主要碳源，KNO3是氮源。配制培养基时，需要先调pH再灭菌，以免调pH时污染培养基。

（4）对放线菌实现分离后，如需对其进行活菌计数，可采用稀释涂布平板法，在此方法中，当样品稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。