Question

近年来，随着抗虫转基因水稻研究的进一步发展，世界各地实验室在抗虫转基因水稻研究方面均有收获，抗虫转基因水稻检测与鉴定随之成为众多科学家的关注点。回答下列问题：

（1）抗虫转基因水稻就是利用转基因技术将从苏云金芽孢杆菌中发现的Bt基因导入水稻的受体细胞中，使其在水稻细胞内表达并遗传，使水稻自身产生抗虫蛋白，进而形成抗虫的新型水稻品种，转基因技术的操作是_________________________________水平上的操作。

（2）抗虫转基因水稻检测的主要内容是检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因、_____________、检测目的基因是否翻译成蛋白质，其中第二种检测采用的是__________技术。

（3）Southern印迹杂交技术通常被用来鉴定外源基因在抗虫转基因水稻中的整合情况，其基本原理是首先用___________酶将水稻基因组酶切消化，标记_________________片段为探针备用，然后将消化的基因组DNA与标记好的探针在杂交膜上进行杂交，包含目的基因的基因组片段与探针会出现__________________________。

（4）在个体生物学水平的鉴定中，试纸条法是将含有特异性______________________（填“抗原”或“抗体”）的提取液交联到试纸条有颜色的物质上，当纸上________________（填“抗原”或“抗体”）和水稻细胞蛋白提取液中特异___________________（填“抗原”或“抗体”）结合之后，再与特异的带有颜色的物质进行反应，于是就在试纸条上出现了三明治状的色带。

Answer

DNA分子 检测目的基因是否转录出了mRNA 分子杂交 限制 目的基因（抗虫基因） 杂交带 抗体 抗体 抗原

【解析】

基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因—DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA—分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质—抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

（1）抗虫转基因水稻就是利用转基因技术将从苏云金芽孢杆菌中发现的Bt基因导入水稻的受体细胞中，使其在水稻细胞内得到表达并遗传，使水稻自身产生抗虫蛋白，进而形成抗虫的新型水稻品种，转基因技术的操作水平是DNA分子水平。

（2）抗虫转基因水稻检测的主要内容是检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因、检测目的基因是否转录出了mRNA、检测目的基因是否翻译成蛋白质，其中第二种检测采用的是分子杂交技术。

（3）Southern印迹杂交技术通常被用来鉴定外源基因在抗虫转基因水稻中的整合情况，其基本原理是首先用限制酶将水稻基因组酶切消化，标记目的基因片段为探针备用，然后将消化的基因组DNA与标记好的探针在杂交膜上进行杂交，包含目的基因的基因组片段与探针会出现杂交带。

（4）在个体生物学水平的鉴定中，试纸条法是将含有特异性抗体的提取液交联到试纸条有颜色的物质上，当纸上抗体和水稻细胞蛋白提取液中特异抗原结合之后，再与特异的带有颜色的物质进行反应，于是就在试纸条上出现了三明治状的色带。