研究发现物质X与肝细胞膜上Y蛋白结合可促进某动物肝脏细胞的增殖，请设计相应的实验方案验证该发现。
实验材料：正常肝脏细胞、Y蛋白基因敲除的肝脏细胞（Y蛋白基因敲除的肝脏细胞增殖能力有所降低）、X物质溶液、培养液，比浊计及实验所需其他试剂和材料。（说明：答题时不考虑加入X后的体积变化等误差，X与Y蛋白不结合时对细胞无影响。提供的细胞均具有分裂能力，只进行原代培养且培养条件适宜，比浊计使用方法不做要求）
（1）实验思路：
①取培养瓶若干个，分组并编号如下：_____________。每组设置若干个重复样品。培养12小时后，其中在A、B两组中加入等量的物质X。
②各组样品在CO2培养箱中培养，每隔6小时各取其中的几个样品，用比浊计测定________并记录数据。由于细胞培养时细胞__________难以形成细胞悬液，所以需加入胰蛋白酶并摇匀后再测定。
③24小时后结束实验统计分析数据，并以此数据为纵坐标绘制曲线。
（2）请用曲线图预测实验结果：______________。
（3）欲进一步研究细胞膜上Y蛋白与X物质的结合会受到Z 物质的干扰（而Z本身不影响细胞增殖），则在原实验基础上需增设的实验组是____________。
（4）分析与讨论：
a．经过研究发现物质X不能促进该动物成骨细胞的增殖，而成骨细胞溶胶中有Y的mRNA，则物质X不能促进成骨细胞增殖的原因可能是__________________________。成骨细胞表面蛋白质多种多样的根本原因是_______________________。
b．欲确定Y 蛋白基因所在的染色体，可在细胞水平上用______________技术来进行基因定位。
回答下列（一）、（二）小题：
（一）日常生活中所使用的生物产品，都是由多种酶经过一系列生化反应的产物。例如用糯米酿酒，就是使用微生物在一定条件下，经过一系列酶促反应获得产物的结果。
（1）首先，糯米中的淀粉在_______的条件下水解成糖，这一过程是由酒曲中的__________产生 的淀粉酶完成的，于是发酵料变甜。然后，在_______________条件下酵母菌经过糖酵解和乙醇发酵反应，产生乙醇。
（2）为获得纯净酵母菌，常常需要用划线分离法获得单菌落。在第二次及以后划线时，总 是从上一次的末端开始划线，这样做的目的是__________________ 。划线的某个平板培养 后，第一划线区域的划线上都不间断的长满了菌落，第二划线区域的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落，造成划线无菌落可能的操作失误有________________（至少答两点）。
（3）可用固定化酵母细胞进行酒精发酵。该操作中需使用海藻酸钠，其作用是____________。 选择固定化酵母细胞而不是固定化酶进行酒精发酵的主要原因是________________。
（二）请回答与基因工程有关问题：
（1）基因工程基本操作步骤，一般包括：目的基因的获取→酶切→连接→_______ →筛选→检测基因的表达。其中第一步中，可用_______扩增的方式获得大量基因；第二步中为防止DNA的自连，我们常使用___________的方式进行酶切；第三步连接反应时为提高连接效率，需注意外源目的基因与质粒比例；第四步将重组DNA 导入受体细胞前，常使用Ca2+处理大肠杆菌，使之成为____________细胞；第五步筛选含有目的基因的受体细胞，常会 借助载体上____________的表达；第六步检测目的基因是否翻译成了病毒蛋白质，利用的 技术是________。
（2）包涵体，是外源基因在大肠杆菌中高效表达时，形成的由膜包裹的高密度、不溶性蛋白质颗粒，无生物学活性。包涵体形成与胞质内蛋白质生成速率有关，短时间内新生成的多肽浓度过高，无充足的时间进行折叠，易形成包涵体，另外，宿主菌的培养条件，如培养基成分、pH值、离子强度等因素也与此有关。对此我们可以采取的措施是___________，诱导培养时对摇床进行 处理。在下游工艺纯化蛋白时，细菌裂解液的澄清工艺很重要，因为裂解液中颗粒物进入层析柱的柱床中填料间隙，会导致层析柱使用时反压升高，从而导致流速___________，影响整个工艺效率。
某雌雄异株植物，叶片形状有细长、圆宽和锯齿等类型。为了研究其遗传机制，进行了杂交实验，结果见下表，后代中存在隐性纯合致死现象。说明：按顺序选用A、a、B、b表示常染色体上的等位基因，D、d、E、e 表示 X 染色体上非同源区段的等位基因，X、Y 染色体上的同源区段不考虑。
杂交编号 | 母本植株数目（表现型） | 父本植株数目（表现型） | F1植株数目（表现型） | F2植株数目（表现型） | |||
Ⅰ | 80 （锯齿） | 82 （圆宽） | 82 （锯齿♂） | 81 （细长♀） | 81 （圆宽） | 242 （锯齿） | 243 （细长） |
Ⅱ | 92 （圆宽） | 90 （锯齿） | 93 （细长♂） | 92 （细长♀） | 93 （圆宽） | 91 （锯齿） | 275 （细长） |
（1）根据杂交组ⅠF1代表现型，可推知基因所控制的叶片形状表现出与________相联系。
（2）根据杂交组ⅡF2代表现型比例，可知叶片形状由________对等位基因控制，遵循__________定律。
（3）杂交组Ⅰ父本、母本基因型分别为_______和_____，F2 代中致死基因型为___________。
（4）选取杂交组ⅡF2代中所有的圆宽叶植株随机杂交，杂交1代中植株的表现型（区分雌 雄）及比例为_______________ ，其中雌株的基因型及比例为_________。
紫花苜蓿是一种蛋白质含量高、营养全面的优质牧草。科研人员在某试验基地对当年播种且水肥适中、正处于分枝期的苜蓿进行了光合作用的日变化观测。请回答问题：
（1）紫花苜蓿捕获光能的物质分布在_____________上，光反应中，光合色素吸收的光能转化成____________；各种色素分子有不同的颜色，是因为一些波长的光透过或被_____。植物缺镁，叶片颜色会发黄的原因是_____________。 碳反应中首先生成的是三碳化合物，有同学猜测此化合物是CO2与某一个二碳分子结合生成的，但当突然_________后，发现RuBP 的含量快速__________，由此推知猜测是错误的。
（2）科研人员选取3个晴天，测定7:30 到17:30的时段内空气CO2浓度，数据显示，观测时段内，空气CO2浓度在 7：30最高，原因是_________。
（3）引起叶片光合速率降低的植物自身因素包括气孔部分关闭引起的气孔限制和叶肉细胞 活性下降引起的非气孔限制两类，前者使胞间CO2 浓度降低，后者使胞间CO2浓度升高。请据图判断植物自身因素中引起紫花苜蓿“光合午休”（11:30 发生）的主要因素是________________。
杜鹃又称布谷鸟，一般栖于森林上层，是捕捉松毛虫的能手。下图是杜鹃丰富的某人工林的能量流动图解，N1~N9表示数量数值，据图回答下列问题：
（1）森林中的杜鹃以松毛虫为食，据此判断杜鹃属于第_____营养级，人工林的物种相对来说较单一，所以种植者常常设法再引入多种且数量不多的其他生物，这样做的意义是________________。
（2）N6_____（填“是”或“不是”）由初级消费者流向蜣螂的能量，其中初级消费者用 于自身生长、发育和繁殖的能量为_________（用图中字母表示）。能量由第一营养级传递给第二营养级的传递效率为_______________（用图中字母表示），图中N3的能量去向除图中所示外，还有_________。
（3）人工林中植物果实可供人食用，人和家畜的粪便可作为沼气发酵的原料，沼气可作为人类的能源物质，沼渣和沼水又可作为肥料供给植物利用，这里的核心技术是______________。
人类遗传病调查中发现两个家系都有甲遗传病（基因为H、h）和乙遗传病（基因为T、t）患者，系谱图如下。已知乙病是伴性遗传病，以往研究表明在正常人群中Hh基因型频率为10-4。下列相关分析正确的是（ ）
A.甲病、乙病都是伴 X 染色体隐性遗传
B.Ⅱ-2 致病基因来自Ⅰ-1和Ⅰ-2，与正常男性婚配儿子一定患病
C.II-5与一两病兼患的女性婚配，后代中正常概率为2/3
D.若II-7 与II-8 再生育一个女儿，则女儿患甲病的概率为1/60000
